应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 奖励金币！！原位杂交探针制备方面的问题！在线等
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 579  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 lzk0207 的 2 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lzk0207

[交流] 奖励金币！！原位杂交探针制备方面的问题！在线等

在制备RNA探针做组织原位杂交时，是否SP6启动子不益用质粒做模板扩增，再用PCR产物做体外转录？？急

[ Last edited by lzk0207 on 2008-4-7 at 21:29 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-04-05 09:42:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzk0207

问一下是否可以用SP6引物直接扩增质粒(有种说法是不能sp6不能用pcr产物作体外转录），就是说SP6启动子是否跟t7一样适合用pcr产物，而不用质粒单酶切。我已经构建了质粒但是是sp6启动子的，只有用SP6引物扩增质粒，不知道可行不？？

[ Last edited by lzk0207 on 2008-4-7 at 03:12 ]
赞一下 回复此楼
6楼2008-04-07 03:08:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lzk0207

凡给出有价值的解答者都可分享金币
赞一下 回复此楼
2楼2008-04-05 09:44:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojingzhang

金虫 (小有名气)
★ ★
lzk0207(金币+1,VIP+0):xiexie
lzk0207(金币+1,VIP+0):问一下是否可以用质SP6引物直接扩增质粒，就是说SP6启动子是否适合用pcr产物，而不是粒单酶切
SP6启动子可以用质粒做模板转录，而且往往比T7启动子得到的产物量更高。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2008-04-05 21:34:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaojingzhang

金虫 (小有名气)
★
lzk0207(金币+1,VIP+0):问一下是否可以用质SP6引物直接扩增质粒，就是说SP6启动子是否适合用pcr产物，而不是粒单酶切,,上一个本来是加给你的，结果给了楼上，，呜呜
你可以将质粒进行单酶切，在你插入片段的下游切开，然后直接用质粒作为转录模板；也可以用质粒做模板PCR，之后切胶回收PCR产物，然后转录。如果不单酶切或者不切胶回收，则会沿着质粒不停转录下去，得到的产物大部分是质粒的转录物，目的片段量很少。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2008-04-05 21:37:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +3 幸运的三木 2026-03-29 4/200 2026-03-29 10:46 by 想上岸了呜呜
[考研] 343求调剂 +4 爱羁绊 2026-03-29 4/200 2026-03-29 10:30 by 唐沐儿
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +8 谷雨上岸 2026-03-23 9/450 2026-03-29 01:00 by 我是小康
[考研] 本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂 +7 AZMK 2026-03-28 11/550 2026-03-28 21:01 by xxxsssccc
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-27 5/250 2026-03-28 14:25 by 唐沐儿
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 9/450 2026-03-28 09:58 by zhshch
[考研] 085404求调剂，总分309，本科经历较为丰富 +4 来财aa 2026-03-25 4/200 2026-03-28 07:41 by 棒棒球手
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 265求调剂11408 +3 刘小鹿lu 2026-03-27 3/150 2026-03-27 20:53 by nihaoar
[考研] 283求调剂（080500） +4 A child 2026-03-27 4/200 2026-03-27 15:34 by XPU李庆
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 12/600 2026-03-27 14:43 by shangxh
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 一志愿陕师大生物学071000，298分，求调剂 +5 SYA！ 2026-03-23 5/250 2026-03-27 09:29 by 不吃魚的貓
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭