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WB背景黑是什么原因? 已有9人参与
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| 我做一个分子量为180kd的蛋白wb,用7%的分离胶,60v转膜3h,5%milk封闭1h,一抗1:1000过夜(内参b-actin 1:1000),TBST 30minx5,二抗1:5000孵育1h,TBST 10x3,ECL显色,胶片曝光,内参很清楚,也很干净,但目的蛋白背景很黑,曝光之前肉眼都能看到整张膜都发亮,但条带还能看出来,请教各位是什么原因。 |
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