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WB背景黑是什么原因？ 已有9人参与
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我做一个分子量为180kd的蛋白wb，用7%的分离胶，60v转膜3h，5%milk封闭1h，一抗1：1000过夜（内参b-actin 1：1000），TBST 30minx5，二抗1：5000孵育1h，TBST 10x3，ECL显色，胶片曝光，内参很清楚，也很干净，但目的蛋白背景很黑，曝光之前肉眼都能看到整张膜都发亮，但条带还能看出来，请教各位是什么原因。 |
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