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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
馨-馨: 金币+1, ★有帮助 2014-07-25 12:23:44
T载体和DH5α用化转就可以了。
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11楼2014-07-18 16:50:29
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代德艳

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
馨-馨: 金币+2, ★有帮助 2014-07-25 12:23:56
引用回帖:
10楼: Originally posted by 馨-馨 at 2014-07-18 15:04:07
打错了，浓度是50mg/ml...

哦 我们是100mg/ml的  那是一样的
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12楼2014-07-19 10:43:28
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馨-馨

银虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-07-18 16:50:29
T载体和DH5α用化转就可以了。

电转不是比化转效率高么。
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13楼2014-07-24 12:30:10
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 馨-馨 at 2014-07-24 12:30:10
电转不是比化转效率高么。...

没必要
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14楼2014-07-24 17:19:21
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
馨-馨: 金币+1, ★有帮助 2014-07-25 12:26:26
首先，你的连接体系建议再考虑下，个人感觉连接效率不会太好，第二，感受态是你自己做的还是买的，转过质粒测试效率了没？第三，搞个ta完全没必要做什么蓝白斑，书本上的东西坑人太狠，没必要花那个钱。

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15楼2014-07-24 21:27:49
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bikexmx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
馨-馨: 金币+2, ★有帮助 2014-07-25 12:26:12
我们用的载体与PCR产物的比例是1:3到1:5，用的氨苄20mg/ml，200ml培养基中加200ul，用的化转。
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前方总有更多挑战，战胜恐惧，勇往向前，加油~~~~
16楼2014-07-25 10:04:09
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馨-馨

银虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-07-24 21:27:49
首先，你的连接体系建议再考虑下，个人感觉连接效率不会太好，第二，感受态是你自己做的还是买的，转过质粒测试效率了没？第三，搞个ta完全没必要做什么蓝白斑，书本上的东西坑人太狠，没必要花那个钱。
...

我们的感受态是自己做的，用空质粒转过，有长出来的。至于连接体系是按照载体说明书上做的
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17楼2014-07-25 12:25:30
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馨-馨

银虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by bikexmx at 2014-07-25 10:04:09
我们用的载体与PCR产物的比例是1:3到1:5，用的氨苄20mg/ml，200ml培养基中加200ul，用的化转。

你们的氨苄加的这么少啊
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18楼2014-07-25 12:26:03
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by 馨-馨 at 2014-07-25 12:25:30
我们的感受态是自己做的，用空质粒转过，有长出来的。至于连接体系是按照载体说明书上做的...

建议不加水，载体加一，其余用PCR产物补齐，再不行，单配连接酶

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19楼2014-07-25 12:37:17
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bikexmx

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 馨-馨 at 2014-07-25 12:26:03
你们的氨苄加的这么少啊...

嗯，一直都是这么用的，没什么问题
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前方总有更多挑战，战胜恐惧，勇往向前，加油~~~~
20楼2014-07-25 14:39:44
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