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银虫 (小有名气)

[求助] 细胞污染,支原体 原虫污染解决方法 已有3人参与

最近一直在做HepG2细胞的单克隆,想让细胞从一个增殖成很多,然而现在遇到了些问题,希望有人帮助
        现在细胞边界很模糊,细胞间隙有点状物质,不运动,粘贴于细胞培养皿底部,液面有时也可见游动的物质,严重情况下见细胞破裂,呈散点状
       长时间不换液,并没有明显浑浊。
      我排除了细菌和真菌的污染。想知道这种情况是否是支原体或者原虫污染。
      支原体污染网上有很多建议,我可以尝试。但是如果原虫污染我该如何解决,除了复苏细胞。

     祈求帮助
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

原虫污染有点神乎其神,先检测一下,可以看看,里面有检测方法,就是设计一对巢式PCR引物,做个PCR,很简单http://wenku.baidu.com/view/d8f6f6a3a0116c175f0e485f.html
4楼2014-07-21 16:12:40
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yanbixing

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果细胞很多的话,直接扔了重新复苏细胞,如果是保种细胞的话,购买相关的灭菌试剂,我见过有这方面的试剂,但是本人没有用过!
   不过,我建议细胞还是不要长时间不换液, 这样细胞生长需要的相关因子及营养不够,状态不好!
2楼2014-07-14 22:31:08
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

根据你的描述,极大可能是支原体污染了。要试用支原体清除类的产品嘛
3楼2014-07-18 10:18:15
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