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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 关于发酵罐染菌，求助
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nakamori0319

金虫 (小有名气)

[求助] 关于发酵罐染菌，求助

我做的菌种发酵周期较长，长得比较慢，发酵周期差不多140 h。在上发酵罐的时候发现，每一罐都在三天左右染菌。做了空白罐(不接种，不取样)，同样染菌。感觉应该不是发酵罐密封性的原因吧，毕竟罐子那么贵。。。好无助，求大家帮忙分析一下原因。。。
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1楼 2014-07-13 21:51:39
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GG夏小妖

新虫 (初入文坛)
我也是做发酵生产的，我只能说我遇到的情况，灭菌必须彻底125℃   20分钟  空消的时候就这样就够了  实消的时候时间根据培养基的状态来调整         无菌空气一定要达到无菌状态   让罐内始终保持正压   针对目标菌种ph值最好实验出最适ph值。   另外就是你的菌种是不是有问题  实验室检测一下 或者再次分离提纯。  染菌不一定是坏事， 如果是达到了互利共生的结果  并且发酵产物的生物特性没有发生改变而时间缩短、产量提高 这是最完美的结局。
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求职模式升级中
22楼2014-07-16 09:44:56
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xuyunjian

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
nakamori0319: 金币+5 2014-07-14 10:51:40
会不会是您的培养基灭菌不彻底，可能是该原因。从您的描述来看，条件是一样的，唯一不同是接种，但若是染菌时间是一样，那就可能是您的大型发酵罐体的灭菌设施存在问题，致使未按要求达到灭菌效果
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相信自己，永不言弃
2楼2014-07-13 22:31:45
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nakamori0319

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xuyunjian at 2014-07-13 22:31:45
会不会是您的培养基灭菌不彻底，可能是该原因。从您的描述来看，条件是一样的，唯一不同是接种，但若是染菌时间是一样，那就可能是您的大型发酵罐体的灭菌设施存在问题，致使未按要求达到灭菌效果

培养基中含有2.5g/L的磷酸氢二钾和2.5的磷酸二氢钾，1的氯化镁和1的氯化钙，灭菌前是澄清的，但是灭菌后就有很多沉淀了，有沉淀会不会造成灭菌不彻底呢？如果灭菌不彻底的话，会在60h才染菌么？非常感谢您的帮助啊
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3楼2014-07-13 23:04:05
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
nakamori0319: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-07-14 10:51:56
引用回帖:
3楼: Originally posted by nakamori0319 at 2014-07-13 23:04:05
培养基中含有2.5g/L的磷酸氢二钾和2.5的磷酸二氢钾，1的氯化镁和1的氯化钙，灭菌前是澄清的，但是灭菌后就有很多沉淀了，有沉淀会不会造成灭菌不彻底呢？如果灭菌不彻底的话，会在60h才染菌么？非常感谢您的帮助啊...

灭菌后有沉淀是正常的，磷酸钙微溶。
不接种也会染菌，那肯定是发酵罐的问题了。
先主要检查3个方面：
1. 一定要先空消，然后再实消。灭菌过程中注意下发酵罐的气压和温度。
2. 检查一下夹套是否漏水。
3. 检查所有气芯，接口。特别是通气口气塞。

同时对整个发酵过程，每2小时取样仔细进行镜检，确定染菌时间，对情况分析会有较大帮助。

你的这种情况，很是常见。因为在发酵初期，染菌不是优势菌，生长滞后缓慢，也就是生长初期；达到一定程度后进入对数生长期，染菌情况迅速能看到。
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4楼2014-07-13 23:55:11
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