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小九537

铁虫 (初入文坛)

[求助] 灰霉的基因敲除 已有2人参与

最近在做灰霉基因敲除工作 进展不太顺利 希望各位好友能提供一套转化效率高的敲除方案 谢过各位!!!!!!
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mochenmi

铜虫 (小有名气)

用的什么方法敲除?
2楼2014-07-14 09:00:48
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以试试IOS技术(重组技术),可以目的基因敲除细胞株的构建、稳转细胞株的构建和蛋白生产、微生物工程菌的构建等细胞生物学等方方面。
3楼2014-07-14 09:06:50
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1204290694

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小九537(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-15 18:45:16
是需要敲除基因的方案吗?如果是的话,知道个可以先进行模拟敲除的方法!用软件包COBRA可进行模拟
4楼2014-07-14 10:21:47
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小九537

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mochenmi at 2014-07-14 09:00:48
用的什么方法敲除?

同源双交换
5楼2014-07-14 19:25:18
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小九537

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 1204290694 at 2014-07-14 10:21:47
是需要敲除基因的方案吗?如果是的话,知道个可以先进行模拟敲除的方法!用软件包COBRA可进行模拟

不是的  就是适合灰霉基因敲除的具体方法 步骤 注意问题 包括试剂之类的。
6楼2014-07-14 19:26:41
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小九537

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yipan at 2014-07-14 09:06:50
可以试试IOS技术(重组技术),可以目的基因敲除细胞株的构建、稳转细胞株的构建和蛋白生产、微生物工程菌的构建等细胞生物学等方方面。

屏蔽????
7楼2014-07-15 09:25:41
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mochenmi

铜虫 (小有名气)


小九537(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-15 18:45:46
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小九537 at 2014-07-14 19:25:18
同源双交换

可以试一下分割标记法,很类似,但是转化效率高多了。挑出来的转化子基本上都是正确的敲除菌株。不像同源重组的,基本上都不是…
8楼2014-07-15 15:01:22
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小九537

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by mochenmi at 2014-07-15 15:01:22
可以试一下分割标记法,很类似,但是转化效率高多了。挑出来的转化子基本上都是正确的敲除菌株。不像同源重组的,基本上都不是…...

是split-marker吧  等于三交换
9楼2014-07-15 19:21:18
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anning529

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

10楼2014-07-16 11:01:30
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