| 查看: 3413 | 回复: 0 | ||
wangdandelia木虫 (正式写手)
|
[求助]
硝酸银染色
|
|
大家好！请问有做PAGE胶电泳后的硝酸银染色的同学吗？我最近开始做脂多糖的鉴定，都没有褐色条带，参照物的标准脂多糖只是呈现阿辛兰的颜色，而我的样品什么颜色都没有。。。 我的步骤是： 1 将胶浸入200 ml 含有 0.005%阿辛兰染料，溶剂含有50%去离子水, 45% EtOH, 5% CH3COOH，振动30rpm，过夜； 2 用含有30%乙醇的 100 mL水溶液洗涤10min,然后100mL水洗5min; 3 200 mL 高碘酸钠浸泡5min; 4 100mL去超纯水水浸泡，洗涤两次，各自5min; 5 硝酸银染料浸泡30min（振荡40rpm），我是用黑色袋子包裹，放在摇床上面摇动。配方是AgNO3 2 g/L (280 mg in 140 water), 1.5 mL NaOH 5M, 然后加入氨水直到沉淀消失；这步我是加了300mL; 6 连续用水洗涤两次； 7 含有甲醛的柠檬酸钠溶液做为显色液，100 mL超纯水, 50 μL 甲醛（37%浓度，放在冰箱里，距离上一次使用的时间超过两年了 ）, 50 μL citrate de sodium 10%。（这个步骤我配了400mL，在显色的过程中不断换新的溶液确保胶的背景干净。 8 直到有条带出现加入固定液：50% eau ultrapure, 45% EtOH, 5% CH3COOH 请问我的步骤有问题吗？大家有什么好的建议吗？实验卡在这里好着急啊！多谢了！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有209人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
