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xissy

铜虫 (小有名气)

[求助] 纯化的蛋白为什么要现在液氮中快速冷冻,再置于-80℃冰箱中? 已有2人参与

请问各位大侠,如题。纯化蛋白的活性很重要。一般我们都是加入终浓度为50%的甘油,然后直接置于-20℃冰箱。今天看文献说加完甘油后,要在液氮中快速冷冻,再放入-80℃冰箱。
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loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xissy(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-11 11:12:10
楼上正解,甘油的话我们以前把蛋白换在储存buffer里(里面大概10%-20%甘油)再冻,PS:50%的甘油还能在20冻住吗?我没试过?
我会绕一个圈,走回到实验室
3楼2014-07-11 09:06:14
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xissy(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-11 11:11:58
避免缓慢冷冻过程中水形成大块的冰对蛋白的损伤。
行至水穷处,坐看云起时
2楼2014-07-10 20:35:25
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xissy

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by loveskyzhou at 2014-07-11 09:06:14
楼上正解,甘油的话我们以前把蛋白换在储存buffer里(里面大概10%-20%甘油)再冻,PS:50%的甘油还能在20冻住吗?我没试过?

不能冻住。但是作为一些分子酶来说,说明书里也写着50%甘油,-20度保存。
4楼2014-07-11 11:31:37
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