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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 纯化的蛋白为什么要现在液氮中快速冷冻，再置于-80℃冰箱中?
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xissy

铜虫 (小有名气)

[求助] 纯化的蛋白为什么要现在液氮中快速冷冻，再置于-80℃冰箱中? 已有2人参与

请问各位大侠，如题。纯化蛋白的活性很重要。一般我们都是加入终浓度为50%的甘油，然后直接置于-20℃冰箱。今天看文献说加完甘油后，要在液氮中快速冷冻，再放入-80℃冰箱。
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1楼 2014-07-10 14:56:15
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xissy(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-11 11:11:58
避免缓慢冷冻过程中水形成大块的冰对蛋白的损伤。
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2014-07-10 20:35:25
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loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xissy(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-11 11:12:10
楼上正解，甘油的话我们以前把蛋白换在储存buffer里（里面大概10%-20%甘油）再冻，PS：50%的甘油还能在20冻住吗？我没试过？
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我会绕一个圈，走回到实验室
3楼2014-07-11 09:06:14
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xissy

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by loveskyzhou at 2014-07-11 09:06:14
楼上正解，甘油的话我们以前把蛋白换在储存buffer里（里面大概10%-20%甘油）再冻，PS：50%的甘油还能在20冻住吗？我没试过？

不能冻住。但是作为一些分子酶来说，说明书里也写着50%甘油，-20度保存。
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4楼2014-07-11 11:31:37
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