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[求助]
大片段连接
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我的外源片段是8000bp（CLA1，PAC1双切）想与腺病毒骨架（切后为28000bp)连接，小弟目前已经连接一年之久，但就是连接不上，每次转化长的斑很少，最多时也不超过30个。麻烦大神们帮帮，谢谢了。 目前我想到的方法有：1、换了商用化的DH5感受态 2、换了不同的腺病毒载体 3、换了不同的连接酶 4、摸过不同的连接比例 我认为可能有点问题：1、我的酶切产物都是一直放在四度 ，有可能有部分降解。 |
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