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巴黎人生

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何用粘度法测定蛋白质分子的分子量 已有7人参与

您好!我想用粘度法测定蛋白质的分子量,可是不知道可不可行?之前已经用电泳试过了,可是结果都不好。请各位大师指点我一下,谢谢!
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ll9999

专家顾问 (文坛精英)

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2楼2014-07-07 23:36:58
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501Visco

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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理论上可行,但是需要方法、计算公式、常数等等。方法:溶剂?毛细管粘度计的号码?(还可能需要不止一根毛细管粘度计)、测试温度等等;计算公式:特性粘度的计算公式,如果有经验公式,就可以直接用;如果没有,就要查找多点法和单点法的公式来计算特性粘度;最后,还要有mark.houwink方程的常数K,a值,以计算粘均分子量。
3楼2014-07-08 09:32:51
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橡胶人

荣誉版主 (文坛精英)

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需要计算 比较麻烦
推荐参阅:http://wenku.baidu.com/link?url= ... TMsB8oM1YAvuwbDMiyO
4楼2014-07-08 09:42:11
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polypro

木虫 (正式写手)

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GPC, SDS-PAGE貌似更简单直接一些,而且较为公认。粘度法测蛋白分子量须确保蛋白构象的一致性,即盐,pH等对结果影响很大
泉涸,鱼相与处于陆,相呴以湿,相濡以沫,不如相忘于江湖。
5楼2014-07-08 10:26:14
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叶客诚

木虫 (著名写手)

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传统的就用乌氏粘度计测量。具体方法一般的物理化学实验书上有,另外现代方法就是用GPC了,简单快速。

[ 发自小木虫客户端 ]
Let me be a quiet and handsomeboy.
6楼2014-07-09 14:21:35
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

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蛋白溶液粘度变化比较小吧,而且和构象关系很大,标准曲线也不太好作
电泳结果不好应该不是电泳这个方法的问题
7楼2014-07-09 15:04:37
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yc258258

木虫 (正式写手)

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应该说电泳是测定蛋白质分子量的一种公认的方法,如果你测出来的效果不好,也许是你样品纯度不够吧,不是方法的问题吧,粘度法貌似很少测定蛋白质的
8楼2014-07-09 15:24:19
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