应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 怎样提高T-vector的转化效率阿？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
131/2返回列表12下一页
查看: 639  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

shielie

铁虫 (初入文坛)

[交流] 怎样提高T-vector的转化效率阿？

各位大虾：小妹想请教一个问题，我做的PCR产物想插入到T-vector(promega公司的）上去，产物长度1900bp,初步筛选用蓝白斑和青霉素抗性，挑选白斑作PCR电泳检测，所选的PCR引物是载体上自带的M13,但是不知道为什么，选的白斑都是假阳性，pcr检测后产物的长度都是300bp，不知道是什么原因
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-03-31 20:28:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lliu

新虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
It was the problem of ligation insteal of transformation.


哈哈哈,是 instead of 吧

[ Last edited by reasonspare on 2008-4-4 at 03:55 ]
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2008-04-01 03:23:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

碧荷叶

铜虫 (初入文坛)
我也有同样的问题，有时连不上
赞一下 回复此楼
3楼2008-04-01 07:41:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shielie

铁虫 (初入文坛)

谢谢回复

谢谢各位,我决定将产物和载体的量比例提到到1:10
赞一下 回复此楼
4楼2008-04-01 09:39:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shielie

铁虫 (初入文坛)

谢谢回复

谢谢各位,我决定将产物和载体的量比例提到到1:10
赞一下 回复此楼
5楼2008-04-01 09:42:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
引用回帖:
Originally posted by shielie at 2008-4-1 09:42:
谢谢各位,我决定将产物和载体的量比例提到到1:10

产物 : 载体=1:10  ???
这样空载岂不是更多了 ？？？
赞一下(10人) 回复此楼
漫洒英雄泪，相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行？一任俺芒鞋破钵随缘化！
6楼2008-04-02 12:55:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
挑选转化子,看质粒大小最直观,与空载体对照.
pcr检测后产物的长度都是300bp.一个很可能得原因是你的PCR产物不纯，或者产物被不完全降解。
原则上说好的T载体不该有蓝斑出现或者数量很少，因为末端突出的T不可能连接环化的。时间久了,T脱落，容易载体自练。如果你的蓝斑比例很高，也要考虑T载体是不是时间太长。条件允许的话，换一下新的载体。
赞一下(10人) 回复此楼
7楼2008-04-02 16:50:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shielie

铁虫 (初入文坛)

10:1后转化的效果

★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):新虫,奖励一下
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
谢谢楼上的各位大虾,小妹的结果如下
编号        结果                                            PCR产物和载体量
1        兰白斑比例适中                                      PCR:3ul---------T-vector :0.5ul
2        兰斑偏多                                             PCR:3ul---------T- vector:0.3ul
3        白斑多，兰斑少                                       Control:2ul--------- T- vector:1ul
4        基本上全是蓝斑，但数量不多                        空载体1ul
赞一下(20人) 回复此楼
8楼2008-04-03 10:19:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shielie

铁虫 (初入文坛)

编号1的结果图片

编号1的结果图片
赞一下 回复此楼
9楼2008-04-03 10:54:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shielie

铁虫 (初入文坛)

编号2的结果图片

编号2的结果图片
http://freep.cn/p.aspx?u=v20__p_0804031052155175_0.jpg
赞一下 回复此楼
10楼2008-04-03 10:55:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shielie 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +9 家佳佳佳佳佳 2026-03-29 9/450 2026-03-30 17:30 by 给你你注意休息
[考研] 293求调剂 +3 末未mm 2026-03-30 5/250 2026-03-30 17:23 by 王保杰33
[考研] 328求调剂 +8 嗯滴的基本都 2026-03-27 8/400 2026-03-30 17:20 by Wang200018
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +12 芋泥小铃铛 2026-03-28 12/600 2026-03-30 17:06 by wangjy2002
[考研] 求化学调剂 +11 wulanna 2026-03-28 11/550 2026-03-30 10:59 by 探123
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +10 麻辣鱿鱼 2026-03-27 11/550 2026-03-29 21:52 by nanaliuyun
[考研] 08工科求调剂286 +3 tgs_001 2026-03-28 3/150 2026-03-29 18:29 by 1018329917
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +4 幸运的三木 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:49 by Miko19
[考研] 一志愿郑州大学，080500学硕，总分317分求调剂 +8 举个栗子oi 2026-03-24 9/450 2026-03-29 13:08 by peike
[考研] 求收留 +5 1943443204 2026-03-28 5/250 2026-03-29 12:11 by 无际的草原
[考研] 352分-085602-一志愿985 +5 海纳百川Ly 2026-03-29 5/250 2026-03-29 09:57 by Sjndkwm
[考研] 0856求调剂 +13 zhn03 2026-03-25 14/700 2026-03-29 08:13 by fmesaito
[考研] 291求调剂 +15 hhhhxn.. 2026-03-23 21/1050 2026-03-28 11:26 by self2008
[考研] 085602 307分 求调剂 +7 不知道叫什么！ 2026-03-26 7/350 2026-03-28 09:57 by 神马都不懂
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭