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likaiii

新虫 (小有名气)

[求助] 请问有虫友做RNA-IP的实验吗?为什么Gapdh总是有条带???

小弟最近一直在做RNA-IP的实验,最后是用RT-PCR来进行验证,阳性结果是有条带的,但是阴性结果(IgG)也有条带,并且Gapdh也有条带,分析可能是非特异性结合的RNA,请问这些非特异结合的RNA怎么去除啊???有没有虫友在做这个实验啊,能不能指点一二???感激不尽!!!!
因为这些非特异结合的RNA,小弟都快崩溃了,望有经验的虫友能分享分享经验,谢谢。
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lym19890612

新虫 (小有名气)

请问楼主,你的RNA-IP的有没有用UV交联啊?
2楼2014-09-28 15:36:01
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likaiii

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lym19890612 at 2014-09-28 15:36:01
请问楼主,你的RNA-IP的有没有用UV交联啊?

没有用UV交联,直接用lysis buffer裂解的样品。朋友也在做RNA-IP吗?
3楼2014-09-29 18:02:54
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lym19890612

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by likaiii at 2014-09-29 18:02:54
没有用UV交联,直接用lysis buffer裂解的样品。朋友也在做RNA-IP吗?...

是啊,我最近在做RNA-IP,没有交联,直接裂解的,不过也是有非特异性结合,不知如何解决
4楼2014-10-06 15:56:15
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猫猫55555

新虫 (初入文坛)

UV交联是指用紫外灯照射细胞么??前辈们有知道照多久的吗?
5楼2016-03-19 23:53:19
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