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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 请问有虫友做RNA-IP的实验吗？为什么Gapdh总是有条带？？？
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likaiii

新虫 (小有名气)

[求助] 请问有虫友做RNA-IP的实验吗？为什么Gapdh总是有条带？？？

小弟最近一直在做RNA-IP的实验，最后是用RT-PCR来进行验证，阳性结果是有条带的，但是阴性结果(IgG)也有条带，并且Gapdh也有条带，分析可能是非特异性结合的RNA，请问这些非特异结合的RNA怎么去除啊？？？有没有虫友在做这个实验啊，能不能指点一二？？？感激不尽！！！！
因为这些非特异结合的RNA，小弟都快崩溃了，望有经验的虫友能分享分享经验，谢谢。
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1楼 2014-07-07 18:21:20
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lym19890612

新虫 (小有名气)
请问楼主，你的RNA-IP的有没有用UV交联啊？
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2楼2014-09-28 15:36:01
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likaiii

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lym19890612 at 2014-09-28 15:36:01
请问楼主，你的RNA-IP的有没有用UV交联啊？

没有用UV交联，直接用lysis buffer裂解的样品。朋友也在做RNA-IP吗？
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3楼2014-09-29 18:02:54
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lym19890612

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by likaiii at 2014-09-29 18:02:54
没有用UV交联，直接用lysis buffer裂解的样品。朋友也在做RNA-IP吗？...

是啊，我最近在做RNA-IP，没有交联，直接裂解的，不过也是有非特异性结合，不知如何解决
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4楼2014-10-06 15:56:15
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猫猫55555

新虫 (初入文坛)
UV交联是指用紫外灯照射细胞么？？前辈们有知道照多久的吗？
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5楼2016-03-19 23:53:19
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