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张冰宝

新虫 (小有名气)

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专业: 地方病学

[求助] 目的片段回收后浓度较低，如何浓缩？已有6人参与

我回收了我的目的片段，条带很暗且稍偏高，浓度有些低，连接表达载体一直连接不上，希望可以把我的目的片段浓缩一下。不知道该如何浓缩，希望知道的大侠们指点一下谢谢

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1楼 2014-07-07 16:14:58

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

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专业: 微生物生理与生物化学

引用回帖:

55楼: Originally posted by 张冰宝 at 2014-07-23 08:54:51
1.我的表达载体是5900bp，我是直接就是酶切产物回收的，就是怕损失。
2.这次涂了两个平板，自己转化的那个板没长，另一个是商品化的阳性质粒，长了满板。可以排除板子和感受态的问题
3.是因为我的两个酶切位点在 ...

10ul体系酶连16-20h后扩大体系至终体积20ul，补加T4酶和buffer再连接过夜试试。~一般二次酶连载体和基因量都得大点才好。