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gaoqx2008

新虫 (小有名气)

[求助] 克隆基因 已有2人参与

大家好
我想请教一下,如何克隆细菌的某一未知基因?如果知晓了中间的序列,如何将两侧的基因也克隆出来?
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yzj926521

新虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2014-07-05 18:57:21
用3`RACE和5`RACE吧
2楼2014-07-05 08:15:21
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gaoqx2008

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yzj926521 at 2014-07-05 08:15:21
用3`RACE和5`RACE吧

您好,细菌dna的克隆也是如此吗!
先提取RNA 吗?
3楼2014-07-05 08:31:30
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yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-07-05 18:57:46
引用回帖:
3楼: Originally posted by gaoqx2008 at 2014-07-05 08:31:30
您好,细菌dna的克隆也是如此吗!
先提取RNA 吗?...

细菌的我没有做过,我做过家禽类的基因
做RACE就是先提RNA的呀
4楼2014-07-05 08:34:25
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Neo2000

木虫 (著名写手)

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感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-07-05 18:57:57
genome walking搞起

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-07-05 09:45:58
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gaoqx2008

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-07-05 09:45:58
genome walking搞起

您好,我想请问下,现在用genome walking多,还是5,3race多?哪一种好点?还有什么好的方法吗 ?
6楼2014-07-06 08:52:56
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


gaoqx2008(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-06 17:46:56
引用回帖:
6楼: Originally posted by gaoqx2008 at 2014-07-06 08:52:56
您好,我想请问下,现在用genome walking多,还是5,3race多?哪一种好点?还有什么好的方法吗 ?...

既然是原核的,genome walking肯定要好一点,或者你可以试试反向PCR,运气好也可能出结果

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-07-06 09:03:26
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789012

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-07-06 09:03:26
既然是原核的,genome walking肯定要好一点,或者你可以试试反向PCR,运气好也可能出结果
...

反向PCR
哈哈
8楼2014-07-06 12:54:33
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gaoqx2008

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yzj926521 at 2014-07-05 08:34:25
细菌的我没有做过,我做过家禽类的基因
做RACE就是先提RNA的呀...

谢谢提供建议!
9楼2014-07-07 08:42:18
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