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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 克隆基因
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gaoqx2008

新虫 (小有名气)

[求助] 克隆基因 已有2人参与

大家好
我想请教一下，如何克隆细菌的某一未知基因？如果知晓了中间的序列，如何将两侧的基因也克隆出来？
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1楼 2014-07-04 14:10:17
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yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2014-07-05 18:57:21
用3`RACE和5`RACE吧
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2楼2014-07-05 08:15:21
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gaoqx2008

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yzj926521 at 2014-07-05 08:15:21
用3`RACE和5`RACE吧

您好，细菌dna的克隆也是如此吗！
先提取RNA 吗？
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3楼2014-07-05 08:31:30
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yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-07-05 18:57:46
引用回帖:
3楼: Originally posted by gaoqx2008 at 2014-07-05 08:31:30
您好，细菌dna的克隆也是如此吗！
先提取RNA 吗？...

细菌的我没有做过，我做过家禽类的基因
做RACE就是先提RNA的呀
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4楼2014-07-05 08:34:25
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-07-05 18:57:57
genome walking搞起

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5楼2014-07-05 09:45:58
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gaoqx2008

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-07-05 09:45:58
genome walking搞起

您好，我想请问下，现在用genome walking多，还是5，3race多？哪一种好点？还有什么好的方法吗 ？
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6楼2014-07-06 08:52:56
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
gaoqx2008(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-06 17:46:56
引用回帖:
6楼: Originally posted by gaoqx2008 at 2014-07-06 08:52:56
您好，我想请问下，现在用genome walking多，还是5，3race多？哪一种好点？还有什么好的方法吗 ？...

既然是原核的，genome walking肯定要好一点，或者你可以试试反向PCR，运气好也可能出结果

[ 发自小木虫客户端 ]
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7楼2014-07-06 09:03:26
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789012

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-07-06 09:03:26
既然是原核的，genome walking肯定要好一点，或者你可以试试反向PCR，运气好也可能出结果
...

反向PCR
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哈哈
8楼2014-07-06 12:54:33
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gaoqx2008

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yzj926521 at 2014-07-05 08:34:25
细菌的我没有做过，我做过家禽类的基因
做RACE就是先提RNA的呀...

谢谢提供建议！
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9楼2014-07-07 08:42:18
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