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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 关于虾青素、β-胡萝卜素、番茄红素的HPLC分离
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jnzhaoxy

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于虾青素、β-胡萝卜素、番茄红素的HPLC分离 已有6人参与

本人现在要做色素的HPLC鉴定，目前有虾青素、β-胡萝卜素、番茄红素的标样，柱子选用的是WATERS的symmentry C18（4.6*250mm）柱子或者Agilent 的Hypersil ODS c18（4.0*250mm）柱子。流动相选用二氯甲烷(A)和乙腈(B)，梯度洗脱。
梯度为          A            B
         0min   0             100
         20      50           50
          30     50          50
          31      0           100
         36       0       100
标样是用氯仿溶解 。
我先用WATERS的跑的，结果连标样都完全跑不出来，而且有很多倒峰。。。
杯具啊，难道梯度有问题？时间不够？或者标样改用二氯甲烷溶可以避免倒峰么？
色素难跑，新手一枚，跪求指点！
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1楼 2014-07-03 16:56:51
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zixilanyue

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

出现倒峰你可以从仪器操作方面考虑一下原因：流动相使用前超声时间不够长，进样前柱子平衡时间不够长，进行液相分析前还要排除气泡干扰。流动相，波长差不多就这样的
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8楼2014-09-15 19:04:53
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pudding9696

无虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主参考下这个 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7467723&fpage=1
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2楼2014-07-04 14:20:02
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jnzhaoxy

新虫 (初入文坛)
再补充一点，检测波长475nm,液相仪是安捷伦1200 ；紫外检测器：氘灯
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3楼2014-07-04 22:46:25
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xtcao668

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jnzhaoxy: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-06 12:51:27
国标中检测方法的流动相和波长都和你的检测条件不符，http://www.cqagri.gov.cn/cqnk/de ... 878&page=18国标中的方法。
具体还可以参考这篇文献
http://onlinelibrary.wiley.com/d ... 68.2008.01278.x/pdf
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生活的理想就是理想的生活
4楼2014-07-05 18:40:38
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