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mulongyan

新虫 (初入文坛)

[求助] 求大家帮我看看wb的胶片,求解决办法 已有3人参与

SDS-PAGE浓缩胶4%,12.5%。蛋白Marker。每泳道上样40μg。首先90V电泳30min,后120V电泳2h。300mM,转膜2h。无蛋白快速封闭液封闭3-5分钟;加入anti-pepc,anti-rubscio一抗(1:1000)室温1-4hr。TBST洗涤3次,每次10min。之后二抗(1:3000)孵育1h,TBST洗涤3次,最后TBS洗1次,每次10min 。在保鲜膜上,平铺膜,加ECL发光液(29050,Engreen),然后暗室曝光检测。羊抗兔HRP标记IgG。曝光后,膜放进丽春红染色液染色,拍照。
这两个一抗都是多克隆抗体,每个片子上都出现了其他的条带?这属于正常现象?能不能把其他的条带去掉呢?
  谢谢,大家

求大家帮我看看wb的胶片,求解决办法
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pudding9696

无虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币-10, 应助指数-1, 屏蔽内容, 违规存档, 广告 2014-07-04 15:22:43
本帖内容被屏蔽

3楼2014-07-04 14:27:56
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-04 11:37:28
mulongyan: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-07-24 11:07:29
问题太多:封闭时间短,一抗孵育室温时间长,二抗浓度高(通常用的二抗是1:5000 - 10000)
2楼2014-07-04 11:22:18
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mulongyan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-07-04 11:22:18
问题太多:封闭时间短,一抗孵育室温时间长,二抗浓度高(通常用的二抗是1:5000 - 10000)

楼主,这个片子其实是我找公司做的,做成这样我都不知道如何跟老板交代。。
4楼2014-07-24 11:08:23
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
4楼: Originally posted by mulongyan at 2014-07-24 11:08:23
楼主,这个片子其实是我找公司做的,做成这样我都不知道如何跟老板交代。。...

找公司交代
5楼2014-07-24 11:10:04
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