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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 普通PCR遇到的问题，求助大神们
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by songzuowei at 2014-07-04 14:56:15
你最下面的引物二聚体也太亮了，引物少加点，看引物问题不是很大，关键是用什么做的模板，质粒的话很容易就扩出来了，基因组或者cDNA的话关键是要保证模板质量，10倍稀释后退火温度用55°扩扩看

好的，谢谢，我按你说的方法试试。
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踏实
11楼2014-07-04 21:40:52
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by songzuowei at 2014-07-04 14:56:15
你最下面的引物二聚体也太亮了，引物少加点，看引物问题不是很大，关键是用什么做的模板，质粒的话很容易就扩出来了，基因组或者cDNA的话关键是要保证模板质量，10倍稀释后退火温度用55°扩扩看

cDNA,只是表达量有点低。我再试试
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踏实
12楼2014-07-04 21:42:42
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 393658000 at 2014-07-04 08:12:09
只能说引物不行  温度太低  小900的片段引物设计好不会很难的

又验证了一遍引物，没有问题，再多一个碱基3端就会出现发夹结构。大神，怎么办？
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踏实
13楼2014-07-07 08:17:18
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