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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » hplc含量测定多个成分时，样品浓度差异太大问题，求高人救急！
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lilianlcx

金虫 (正式写手)

[求助] hplc含量测定多个成分时，样品浓度差异太大问题，求高人救急！已有3人参与

如题，hplc含量测定多个成分时，样品浓度差异太大，以至于做线性对照品无法配置！
本人在高效液相含量测定时，总共7个成分，其中一个成分（黄芩苷）在样品中的响应值特别高，我试着制备样品时称量减半以使浓度降低，但就又存在一个问题了，黄芩苷浓度依然很高，而且其中2成分测不到了。没办法，就按高浓度做线性，发现若按这样的浓度做线性的话，黄芩苷对照品浓度得配成1.6mg/ml，本来都准备豁出去称16mg溶解在10ml容量瓶中，发现配的对照品黄芩苷溶液根本不溶，各种超声、加热，最后也是呈现絮状物~这是作死的节奏啊~求大神解救我~
另外，我做线性的思路：我先进了一针对照品，再进了一针样品，然后根据样品峰面积跟对照品峰面积与浓度计算的样品中各成分的含量，欲以这个含量的4倍做线性的最高点逐渐稀释~~~~我知道这样计算是很粗糙的，但我试着把对照品浓度稀释了再进样发现浓度差别不是太大，比如黄芩苷最大浓度为0.46mg/ml，最小的也计算在0.42mg/ml~
哎，我是液相新手，麻烦大家啦！
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愿家人平平安安，工作顺利，一切都安好!
1楼2014-07-02 08:37:28
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喵喵与咩咩

铁杆木虫 (著名写手)

要把生活过成诗和远方

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lilianlcx: 金币+3, ★★★很有帮助, 感谢你 2014-07-02 16:40:27
在做实验之前，需要先调查一下前人做相关项目的经验
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生命不息，奋斗不止
2楼2014-07-02 15:19:24
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bully_zhu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
7个成分混标，高材生！！建议分别建立标线，或者将响应值差不多进行混标，黄芩苷单独做标线！这样难度会小很多，而且就是方法学要进的针多一点。
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宠辱不惊,看庭前花开花落.去留无意,望天上云卷云舒
3楼2014-07-02 15:33:27
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wangzunchen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
每个成分要单独做标曲啊，不用管其他成分啊，
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4楼2014-07-02 16:33:05
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