24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 174  |  回复: 7
当前主题已经存档。

skkyy88888

铜虫 (著名写手)

[交流] 原核表达

各位大侠,你们做原核表达在连接那一步,挑取正确重组子的比率是多少,我今天挑了二十个做菌液PCR,只有一个出来,也不知道正确不正确。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

送去测序啊
帮助虫友,提升自己
2楼2008-03-29 16:59:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asr

荣誉版主 (知名作家)

可以再酶切验证一下

一般选中间,大小均一的菌落,可能要好点。
思想极度邪恶,勿怕勿怪!\(^o^)/~
3楼2008-03-29 17:20:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhuifang909

金虫 (初入文坛)

我也在做这个,开始还长了一些菌斑,但没有阳性的。又做了好几次,却连一个斑都不长了,郁闷阿
4楼2008-03-30 09:44:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

那你的转化效率确实不高啊,可以从新转化,或者直接PCR检测出现的较少的阳性克隆。。我做原核的时候,经常选个体比较大的菌落,结果还比较如意。有时候选择个体中等,大小均一的菌落,也可以得到较好的效果。反正都要经过PCR检测。检测后有条带的,而且是比较亮的条带的模板菌体送出去测序就可以了。
5楼2008-03-30 10:29:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

挑取正确重组子的比率好像没有固定的。菌液的PCR可能有时候不太准的。呵呵。测序最好了。
活着就要让人感受到你的存在。
6楼2008-03-30 10:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunyunhappy

铜虫 (小有名气)

影响连接效率的因素很多的,没有一个确切的比率
只要有你想要的,一个阳性克隆就足够了
7楼2008-03-30 11:03:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

我之前做的PCR没有条带,但是提取质粒后酶切也有目的基因的片段
你的日子如何,你的力量也必如何!
8楼2008-03-30 11:20:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 skkyy88888 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +14 zhubinhao 2026-03-27 14/700 2026-03-29 10:01 by Sjndkwm
[考研] 316求调剂 +7 江辞666 2026-03-26 7/350 2026-03-28 21:28 by sanrepian
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 4/200 2026-03-28 14:30 by QiMing7
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +3 萝卜炖青菜 2026-03-28 3/150 2026-03-28 14:11 by 唐沐儿
[考研] 求化学调剂 +4 wulanna 2026-03-28 4/200 2026-03-28 13:37 by 唐沐儿
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +6 脚滑的守法公民 2026-03-27 6/300 2026-03-28 11:02 by gjlllb
[考研] 0856,材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-03-28 10:56 by self2008
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 085600,材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +10 材料学257求调剂 2026-03-23 11/550 2026-03-27 10:13 by YCIT- LHL
[考研] 材料学硕,求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 求调剂,一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +4 @taotao 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:10 by hypershenger
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +4 柳溪边 2026-03-26 4/200 2026-03-26 21:14 by XPU李庆
[考研] 机械学硕310分,数一英一,一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
信息提示
请填处理意见