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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)

[交流] 原核表达

各位大侠,你们做原核表达在连接那一步,挑取正确重组子的比率是多少,我今天挑了二十个做菌液PCR,只有一个出来,也不知道正确不正确。
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asr

荣誉版主 (知名作家)

可以再酶切验证一下

一般选中间,大小均一的菌落,可能要好点。
思想极度邪恶,勿怕勿怪!\(^o^)/~
3楼2008-03-29 17:20:51
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wuhuifang909

金虫 (初入文坛)

我也在做这个,开始还长了一些菌斑,但没有阳性的。又做了好几次,却连一个斑都不长了,郁闷阿
4楼2008-03-30 09:44:42
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bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

那你的转化效率确实不高啊,可以从新转化,或者直接PCR检测出现的较少的阳性克隆。。我做原核的时候,经常选个体比较大的菌落,结果还比较如意。有时候选择个体中等,大小均一的菌落,也可以得到较好的效果。反正都要经过PCR检测。检测后有条带的,而且是比较亮的条带的模板菌体送出去测序就可以了。
5楼2008-03-30 10:29:20
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xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

挑取正确重组子的比率好像没有固定的。菌液的PCR可能有时候不太准的。呵呵。测序最好了。
活着就要让人感受到你的存在。
6楼2008-03-30 10:44:04
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