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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 酶活测定
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富硒贡茶

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶活测定 已有5人参与

酶活测定过程中背景的OD值（灭酶活的OD）很大，扣除背景后计算酶活就很少了。。。。。为什么，既然酶液中有还原糖，肯定是被降解的，为什么计算的酶活还很低
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1楼 2014-07-01 12:19:53
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1037053695

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也遇到了同样的问题 ，我测得是蛋白酶活 用的国标，背景跟样品的OD相差很少，酶活不低啊，颜色挺深的
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4楼2014-07-02 09:23:05
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kaihui99

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-07-01 23:01:42
OD值范围0.2~0.8之内算是精准的。
你用溶剂(水）对照一下，是不是在这个范围之内？
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2楼2014-07-01 17:20:43
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富硒贡茶

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kaihui99 at 2014-07-01 17:20:43
OD值范围0.2~0.8之内算是精准的。
你用溶剂(水）对照一下，是不是在这个范围之内？

是在此范围内，比如酶与底物反应后OD为0.5，那么对照组背景中的OD就有0.3。。。。。。。。背景中的还原糖是被降解得来的，说明酶活应该很高，但实测却很少
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3楼2014-07-01 20:30:46
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liuyi8203

金虫 (小有名气)
最近我也在测酶活，请问你用的空白对照是“水”还是“空白培养基”，我用空白培养基之后实验组出现了负值，难道接了菌的培养基比没有接菌的培养基酶活还低？（此酶就胞外酶），求解释....
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5楼2014-07-02 16:50:35
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