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大漠雪狼
金虫
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注册: 2012-11-01
性别: GG
专业: 作物分子育种
[
求助
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酶切连接
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哪位大神知道,采用PSTⅠ酶切小片段与PSTⅠ酶切大片段连接,连了好多次都连不上,求大神指导!!!
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散金
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2014-06-29 23:18:47
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smdsfy
铜虫
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性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流!
2014-07-15 15:28:32
连接不上,你的两个片段的切口是否一致?你连接的两个片段有没有跑胶检测,有东西么?你的连接酶有没有过期,有阴阳性对照么?
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6楼
2014-07-01 15:59:34
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yzj926521
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注册: 2014-06-25
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专业: 动物遗传学
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助
2014-06-30 20:59:33
我也是呢,双酶切连接了两个月了都还没有连进去,排除各种可能原因,试着用的其他方法都不成功,也是很苦恼
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2楼
2014-06-30 08:13:39
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注册: 2013-07-09
专业: 生物物理、生物化学与分子
单酶切??这样的话会自连啊。
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3楼
2014-06-30 10:46:57
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大漠雪狼(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流
2014-06-30 20:59:42
首先应该考虑的是两个片段的比例问题,然后注意一下你的连接条件,最好用最合适的温度
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每日三省吾身,平静,定气
4楼
2014-06-30 12:17:26
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