应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切连接
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 773  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

大漠雪狼

金虫 (初入文坛)

[求助] 酶切连接 已有4人参与

哪位大神知道，采用PSTⅠ酶切小片段与PSTⅠ酶切大片段连接，连了好多次都连不上，求大神指导！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
今天为明天而努力。
1楼 2014-06-29 23:18:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzj926521

新虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-06-30 20:59:33
我也是呢，双酶切连接了两个月了都还没有连进去，排除各种可能原因，试着用的其他方法都不成功，也是很苦恼
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-30 08:13:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
单酶切？？这样的话会自连啊。
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-30 10:46:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

55liuyan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
大漠雪狼(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-30 20:59:42
首先应该考虑的是两个片段的比例问题，然后注意一下你的连接条件，最好用最合适的温度
赞一下 回复此楼
每日三省吾身，平静，定气
4楼2014-06-30 12:17:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuanyalizi

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-06-30 23:46:19
单酶切的话考虑将载体做去磷酸化，片段磷酸化，应该可以做出来的。你说的没连上是没长转化子还是全是空载背景，这是有差别的。如果没长克隆可能是感受态的问题，如果是背景就是没连上，另外建议多挑些克隆做菌落PCR。
赞一下(1人) 回复此楼
闲适恬淡，宠辱不惊
5楼2014-06-30 22:08:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smdsfy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 15:28:32
连接不上，你的两个片段的切口是否一致？你连接的两个片段有没有跑胶检测，有东西么？你的连接酶有没有过期，有阴阳性对照么？
赞一下 回复此楼
6楼2014-07-01 15:59:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 大漠雪狼 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本科985，专业0812分336求调剂 +3 莫莫很行 2026-04-03 3/150 2026-04-03 17:01 by 1962910217
[考研] 266分，求材料相关专业调剂 +13 哇呼哼呼哼 2026-03-30 15/750 2026-04-03 15:24 by arrow8852
[考研] 求调剂 +7 akdhjs 2026-04-03 7/350 2026-04-03 14:21 by 化学化工硕士招�
[考研] 调剂求助 +8 想换手机不想解� 2026-04-02 11/550 2026-04-03 14:16 by 星空星月
[考研] 315分 085602 求调剂 +15 26考研上岸版26 2026-04-02 15/750 2026-04-03 12:45 by xingguangj
[考研] 建环，能源，土木老师路过看一看！！！ +5 嘿嘿uu 2026-04-01 5/250 2026-04-03 11:47 by znian
[考研] 复试调剂 +3 bvzz 2026-04-01 3/150 2026-04-03 09:47 by 蓝云思雨
[考研] 294求调剂 +3 Grey_Ey 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:34 by swb0218
[考研] 285求调剂 +14 AZMK 2026-04-02 14/700 2026-04-02 15:54 by 上九天揽月（好�
[考研] 考研调剂 +12 Amber00 2026-03-31 12/600 2026-04-02 09:04 by sanrepian
[考研] 301求调剂 +13 A_JiXing 2026-04-01 13/650 2026-04-02 09:01 by sanrepian
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-01 12/600 2026-04-02 00:21 by 百秒光年
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
[考研] 安全工程 285 求调剂 +3 Xinyu56 2026-04-01 4/200 2026-04-01 21:50 by 静静静静静静静�
[考研] 省双一流重点一本大学招收调剂 +4 wwwwffffff 2026-03-31 7/350 2026-04-01 15:23 by wwwwffffff
[考研] 一志愿北交材料工程总分358 +5 cs0106 2026-04-01 7/350 2026-04-01 11:45 by wangjy2002
[考研] 318求调剂 +8 七忆77 2026-04-01 8/400 2026-04-01 10:37 by Jaylen.
[考研] 一志愿武理材料工程302调剂环化或化工 +15 Doleres 2026-03-31 16/800 2026-04-01 09:49 by lfj11
[考研] 318求调剂 +10 陈晨79 2026-03-30 10/500 2026-03-31 17:37 by 544594351
[考研] 吉大生物学326分求调剂 +3 sunnyupup 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:28 by longlotian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭