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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 质粒，PCR产物双酶切后胶回收不回来？求大神指导！
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yln819

新虫 (正式写手)

[求助] 质粒，PCR产物双酶切后胶回收不回来？求大神指导！ 已有9人参与

我质粒、PCR产物双酶切后回收不回来，切胶的时候质粒是用了五个泳道的胶，pcr用了三个泳道的，可回收后还是没有条带！求指导！谢谢！
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1楼 2014-06-27 10:12:37
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yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 952038213 at 2014-06-28 18:28:05
试剂盒没问题的话，应该是上样量不够。我最近刚做的酶切回收3000个10000的，上样量20ul，结果条带很浅，割胶回收后只有5.2ng/ul。然后我又50多上样，回收浓度还是很少，不过还好够我连接了。还有建议你下次再提问把 ...

好的，谢谢
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24楼2014-06-29 19:51:12
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yln819: 金币+2, ★有帮助 2014-06-27 10:59:01
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-27 12:06:36
你质粒，PCR产物大约切了多少的量？
质粒多大？  载体骨架多大？   PCR产物多大？
下次把跑胶后的那个要切的胶图挂上来看看。
祝早成功。
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-27 10:49:45
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wolovexiehe

铁虫 (初入文坛)
是不是片段太多，回收柱子不合适
赞一下(1人) 回复此楼
即使失去一切，也不失去微笑
3楼2014-06-27 10:52:47
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yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-27 10:49:45
你质粒，PCR产物大约切了多少的量？
质粒多大？  载体骨架多大？   PCR产物多大？
下次把跑胶后的那个要切的胶图挂上来看看。
祝早成功。

质粒加了1ul，PCR产物3ul，酶1ul；质粒3000bp，PCR1000多bp
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-27 10:58:46
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