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关于湖泊沉积物DNA提取的问题！ 已有2人参与
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| 用Fast DNA spin kit for soil试剂盒提取的湖泊沉积物DNA ，OD260/OD280 1.7左右 OD260/OD230 0.2左右 （很低了） 不知道这些DNA能不能用于后续的实验（DGGE、、克隆测序、定量PCR等）？ |
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【答案】应助回帖
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EATY(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-06-26 22:07:07
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关于DNA纯度鉴定，纯的DNA溶液其OD260/OD280应为1.8，OD260/OD230应大于2.0。OD260/OD280≈1.8(＞1.9，表明有RNA污染；＜1.6，表明有蛋白质、酚等污染） OD230、260、280、320下的吸光度分别代表了盐浓度、核酸、蛋白等有机物、背景（溶液浑浊度）的值。一般的，我们只看OD260/OD280（Ratio)。不知道你的OD260/OD280比值是多少？ 制备基因组DNA通常要求得到的片段的长度不小于100-200kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。 除了测浓度外，还可以跑个电泳来鉴定一下：取1μg基因组DNA，在0.8%琼脂糖凝胶上电泳，检测DNA的完整性，或多个样品的浓度是否相同。电泳结束后在点样孔附近应有单一的高分子量条带。 我提的DNAOD260/OD280在2.1~2.3之间 那有可能存在RNA的污染，加RNA酶处理一下吧！如果DNA浓度产量较高的话，可以重复抽提步骤一遍。 先跑个电泳看看如何吧？ |
2楼2014-06-26 21:57:06
3楼2014-06-27 09:04:43
youlinglyw
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