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caiqingchong木虫 (著名写手)
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[交流]
我的重组蛋白用什么条件才可能可溶表达？
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我一个蛋白，40K多点，克隆在PET29a中，BL21表达。我摸过很多条件，包括低温，20，25，30，37度，用过不同的IPTG浓度，0.05mM-1.2mM诱导，时间从诱导4h-12h，均不能出现可溶蛋白，只在包涵体中出现，这样不能侧活性，复性的话太麻烦，还不一定成。 我用什么条件才可能使蛋白在上清中出现呢，哪怕只有少量的？当然最好不要换载体等，那样太麻烦，不是很值得。 |
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