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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞周期试剂盒哪个牌子最好做？
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我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 细胞周期试剂盒哪个牌子最好做？

1.细胞周期试剂盒哪个牌子最好做？我找到SAB这牌子周期试剂盒用到400 mesh sieve,没见过没听过啊?有前辈用过吗？
2.caspase3,8,9三种试剂盒操作一样吗？离心需要多大转速？我细胞室离心机最大4000/min,机器换算后是2200RCF。这个够吗？
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为爱而生
1楼 2014-06-25 15:26:16
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dhzcpu

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我听五月天: 金币+3 2014-06-28 13:26:52
我们用的碧云天的，还好啊！
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永远留在大学里！
2楼2014-06-27 21:21:22
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dhzcpu at 2014-06-27 21:21:22
我们用的碧云天的，还好啊！

谢谢！你都用试剂盒做过哪些？
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为爱而生
3楼2014-06-28 13:27:16
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yu91

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
我听五月天: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-06-30 22:00:07
caspase 3 8 9 正好前段时间做过。我用的是Biovision的试剂盒，做法上基本是一样的 只是在单次测试时所需的蛋白量的差别。但是如果用六孔板做的话其实处理的步骤都是一样的。在裂解完细胞，离心沉淀碎片时，可能需要超过1000g差不多也在一万转以上。
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中国药科-厦门大学
4楼2014-06-30 11:21:40
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yu91 at 2014-06-30 11:21:40
caspase 3 8 9 正好前段时间做过。我用的是Biovision的试剂盒，做法上基本是一样的 只是在单次测试时所需的蛋白量的差别。但是如果用六孔板做的话其实处理的步骤都是一样的。在裂解完细胞，离心沉淀碎片时，可能需要 ...

灰常感谢~确认一下~离心之后酶是在上清里对吧?
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为爱而生
5楼2014-06-30 22:11:35
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yu91 at 2014-06-30 11:21:40
caspase 3 8 9 正好前段时间做过。我用的是Biovision的试剂盒，做法上基本是一样的 只是在单次测试时所需的蛋白量的差别。但是如果用六孔板做的话其实处理的步骤都是一样的。在裂解完细胞，离心沉淀碎片时，可能需要 ...

你好！caspase试剂盒尽量使蛋白浓度达到1-3mg/ml，不知道你是不是用六孔板做的样品？每个孔加了多少细胞？
因为我的药抑制增殖很厉害，所以不知道给药组要收集到多少细胞才能提取足够caspase酶~
谢谢~~
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为爱而生
6楼2014-07-01 14:50:22
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yu91 at 2014-06-30 11:21:40
caspase 3 8 9 正好前段时间做过。我用的是Biovision的试剂盒，做法上基本是一样的 只是在单次测试时所需的蛋白量的差别。但是如果用六孔板做的话其实处理的步骤都是一样的。在裂解完细胞，离心沉淀碎片时，可能需要 ...

嘿嘿嘿，还有个问题！你做caspase 3 8 9 之前有没有查到文献里报道了三种酶都是否都能做出阳性结果？
我没查到我用的化合物诱导我用的细胞caspase-8，9激活的文章，只有caspase-3查到了。
谢谢！
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为爱而生
7楼2014-07-01 20:25:11
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xdwjw2012

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dhzcpu at 2014-06-27 21:21:22
我们用的碧云天的，还好啊！

你好，我看碧云天上的用于细胞周期研究的试剂盒只有50次规格的，而实验要用96孔板做，这个试剂盒的规格是不是小了一些？
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8楼2015-12-22 11:02:42
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xdwjw2012

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dhzcpu at 2014-06-27 21:21:22
我们用的碧云天的，还好啊！

不好意思啊，我刚才又看了实验要求，没说用96孔板，由于我是第一次做细胞周期研究，所以我想问一下用多少孔板比较合适？
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9楼2015-12-22 11:06:21
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