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我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 细胞周期试剂盒哪个牌子最好做?

1.细胞周期试剂盒哪个牌子最好做?我找到SAB这牌子周期试剂盒用到400 mesh sieve,没见过没听过啊?有前辈用过吗?
2.caspase3,8,9三种试剂盒操作一样吗?离心需要多大转速?我细胞室离心机最大4000/min,机器换算后是2200RCF。这个够吗?
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为爱而生
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我听五月天

木虫 (正式写手)

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2楼: Originally posted by dhzcpu at 2014-06-27 21:21:22
我们用的碧云天的,还好啊!

谢谢!你都用试剂盒做过哪些?
为爱而生
3楼2014-06-28 13:27:16
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我听五月天

木虫 (正式写手)

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4楼: Originally posted by yu91 at 2014-06-30 11:21:40
caspase 3 8 9 正好前段时间做过。我用的是Biovision的试剂盒,做法上基本是一样的 只是在单次测试时所需的蛋白量的差别。但是如果用六孔板做的话其实处理的步骤都是一样的。在裂解完细胞,离心沉淀碎片时,可能需要 ...

灰常感谢~确认一下~离心之后酶是在上清里对吧?
为爱而生
5楼2014-06-30 22:11:35
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我听五月天

木虫 (正式写手)

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4楼: Originally posted by yu91 at 2014-06-30 11:21:40
caspase 3 8 9 正好前段时间做过。我用的是Biovision的试剂盒,做法上基本是一样的 只是在单次测试时所需的蛋白量的差别。但是如果用六孔板做的话其实处理的步骤都是一样的。在裂解完细胞,离心沉淀碎片时,可能需要 ...

你好!caspase试剂盒尽量使蛋白浓度达到1-3mg/ml,不知道你是不是用六孔板做的样品?每个孔加了多少细胞?
因为我的药抑制增殖很厉害,所以不知道给药组要收集到多少细胞才能提取足够caspase酶~
谢谢~~
为爱而生
6楼2014-07-01 14:50:22
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我听五月天

木虫 (正式写手)

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4楼: Originally posted by yu91 at 2014-06-30 11:21:40
caspase 3 8 9 正好前段时间做过。我用的是Biovision的试剂盒,做法上基本是一样的 只是在单次测试时所需的蛋白量的差别。但是如果用六孔板做的话其实处理的步骤都是一样的。在裂解完细胞,离心沉淀碎片时,可能需要 ...

嘿嘿嘿,还有个问题!你做caspase 3 8 9 之前有没有查到文献里报道了三种酶都是否都能做出阳性结果?
我没查到我用的化合物诱导我用的细胞caspase-8,9激活的文章,只有caspase-3查到了。
谢谢!
为爱而生
7楼2014-07-01 20:25:11
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