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使用荧光分光光度计出现的怪事！
我正在用ThT（硫磺素）检测一种多肽的聚集过程，这中间，多肽会形成β-片层结构，和ThT结合，发出荧光。这些是文献和书中说的。我做出来的结果完全不符合这些。首先文献中报道随着时间延长，基本在半个月左右，荧光会逐渐增加，达到一个近似平台的程度。我的结果却忽高忽低，没有一个稳定的趋势。其次，我看到一篇文，说用溶剂做对照，我就试了试，结果，溶剂对照（不含ThT）比含ThT的样品还要高。有的时候，ThT对照也比样品的高。并且不管有没有加ThT，在应该出峰的485nm处都有一个较高的峰，其他地方没有。这一点太奇怪了！
我检测时分别用了波长模式下EX、EM两种模式和时间扫描模式。仪器是Hitachi的FL-2500。不知大家是怎么做的。 |
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