24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zhaoxinrui0511

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 791.3
散金: 14
红花: 1
帖子: 95
在线: 75小时
虫号: 272729
注册: 2006-08-19
性别: GG
专业: 食品科学基础

[求助] 如何获得含有内含子基因的完整cDNA序列？已有4人参与

我要扩增的是一个黑曲霉基因（含有两段内含子）的cDNA序列，基因结构是这样的：
1-186是外显子（186 bp）
187-232是内含子
233-313是外显子（81 bp）
314-362是内含子
363-1583是外显子（1221 bp）
之前尝试了分别用PCR扩增三段外显子，再用融合PCR的方法连接，但由于前两个外显子片段太短而失败了，
请问有其他什么好办法吗？

回复此楼

» 猜你喜欢

解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景已经有0人回复
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有144人回复
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析已经有1人回复
Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展已经有0人回复
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍已经有0人回复
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner 已经有0人回复
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner 已经有0人回复
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner 已经有0人回复
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner 已经有0人回复
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂已经有0人回复

1楼 2014-06-22 02:07:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zhaoxinrui0511

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 791.3
散金: 14
红花: 1
帖子: 95
在线: 75小时
虫号: 272729
注册: 2006-08-19
性别: GG
专业: 食品科学基础

引用回帖:

11楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-06-22 18:03:23
要么RT，要么公司合成...

谢谢

回复此楼

13楼2014-06-22 21:37:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 16 个回答

lone007

捐助贵宾 (正式写手)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 2499.8
散金: 216
红花: 2
帖子: 312
在线: 117.3小时
虫号: 3074445
注册: 2014-03-17
性别: GG
专业: 分子影像与分子探针

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-06-22 11:32:34
zhaoxinrui0511: 金币+2, ★★★很有帮助, 不好意思，可能是我没表述清楚，我需要的是没有内含子的基因序列，除了RT之外，还有其他的方法吗 2014-06-22 16:08:03

cDNA的定义是：以成熟mRNA为模板在逆转录酶的作用下合成DNA单链，之后在DNA聚合酶的作用下合成的双链DNA。成熟的mRNA是不含有内含子的，因此，cDNA可以视为是基因组全部外显子的集合，无论你怎么扩都不会包含内含子。