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afeng541888

金虫 (正式写手)

木虫彪哥--钢钢的

应助: 0 (幼儿园)
贵宾: 0.6
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帖子: 547
在线:
虫号: 323918
注册: 2007-03-14
性别: GG
专业: 基因工程

[交流] 【有奖求助】琼脂不溶解是怎么回事

本人做植物组织培养，最近总是出现琼脂溶解不好的情况，以前是成块的，现在都是软软的，不知何故，应该不是琼脂的问题，换了好几个牌子了。
我用高压灭菌锅灭菌25分钟，121摄氏度。

请问：琼脂在这种情况下能溶解吗，应该没问题啊，以前可以的，最近还特意加大了ph值到6.0，请各位帮忙分析下原因。

在补充一下问题：我放8g琼脂，用灭菌锅121度，25分钟

[ Last edited by afeng541888 on 2008-3-27 at 11:30 ]

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1楼 2008-03-26 08:19:54

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

qinying

木虫 (著名写手)

应助: 1 (幼儿园)
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红花: 2
帖子: 2450
在线: 200.7小时
虫号: 507136
注册: 2008-02-19
性别: MM
专业: 系统生物学

个人认为可能的原因：
1.琼脂量加少了.质量好象不是主要问题。质量差的杂质多，倒是问题。温度过高,培养基中的糖炭化,会出现咖啡色培养基,但不影响固化.而pH值降低,会在一定程度上影响琼脂的软硬,但是好象效果并不明显.
2.温度的掌握似乎最有可能。灭菌锅电源切断后，压力表回零后，最好等一等，再取培养基。倒培养基时温度不宜过高。如果不是低熔点琼脂的话，60度左右比较合适。固定过程中不要摇动培养皿／瓶，如果晃动，有可能让刚刚开始固化的培养基出现凝结不上，变软的问题。一切程序在超净台上进行，等其%B