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afeng541888

金虫 (正式写手)

木虫彪哥--钢钢的

[交流] 【有奖求助】琼脂不溶解是怎么回事

本人做植物组织培养,最近总是出现琼脂溶解不好的情况,以前是成块的,现在都是软软的,不知何故,应该不是琼脂的问题,换了好几个牌子了。
我用高压灭菌锅灭菌25分钟,121摄氏度。

请问:琼脂在这种情况下能溶解吗,应该没问题啊,以前可以的,最近还特意加大了ph值到6.0,请各位帮忙分析下原因。


在补充一下问题:我放8g琼脂,用灭菌锅121度,25分钟

[ Last edited by afeng541888 on 2008-3-27 at 11:30 ]
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人

★ ★
afeng541888(金币+2,VIP+0):谢谢
你测一下培养基的PH值,酸性时琼脂的凝胶就很软。另外温度最好不要高于125℃,控制好。
细推物理须行乐。
2楼2008-03-26 08:27:25
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cauxiaogong

★ ★
afeng541888(金币+2,VIP+0):谢谢
琼脂在PH大于5都可以凝的,一般你加琼脂的量多少? 质量好的琼脂粉13g就可以,差一些的就20g。要是你用的琼脂粉的化就更应该多些。
3楼2008-03-26 08:52:38
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叶子1983

铜虫 (小有名气)

★ ★
afeng541888(金币+2,VIP+0):谢谢
温度应该很重要的,还有你使用什么溶液溶解的呢?
4楼2008-03-26 09:36:13
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vicarner

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
afeng541888(金币+5,VIP+0):谢谢
一共有下列4中情况:
1.琼脂质量。
2.pH值。
3.灭菌温度。
4.培养基组成。
如果以上问题都可以排除,则是传说中的RP问题啦!呵呵~~
5楼2008-03-26 09:52:44
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qinying

木虫 (著名写手)

个人认为可能的原因:
1.琼脂量加少了.质量好象不是主要问题。质量差的杂质多,倒是问题。温度过高,培养基中的糖炭化,会出现咖啡色培养基,但不影响固化.而pH值降低,会在一定程度上影响琼脂的软硬,但是好象效果并不明显.
2.温度的掌握似乎最有可能。灭菌锅电源切断后,压力表回零后,最好等一等,再取培养基。倒培养基时温度不宜过高。如果不是低熔点琼脂的话,60度左右比较合适。固定过程中不要摇动培养皿/瓶,如果晃动,有可能让刚刚开始固化的培养基出现凝结不上,变软的问题。一切程序在超净台上进行,等其%B
云在天边,水在瓶。
6楼2008-03-26 11:40:58
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qinying

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
afeng541888(金币+8,VIP+0):谢谢
个人认为可能的原因:
1.琼脂量加少了.质量好象不是主要问题。质量差的杂质多,倒是问题。温度过高,培养基中的糖炭化,会出现咖啡色培养基,但不影响固化.而pH值降低,会在一定程度上影响琼脂的软硬,但是好象效果并不明显.
2.温度的掌握似乎最有可能。灭菌锅电源切断后,压力表回零后,最好等一等,再取培养基。倒培养基时温度不宜过高。如果不是低熔点琼脂的话,60度左右比较合适。固定过程中不要摇动培养皿/瓶,如果晃动,有可能让刚刚开始固化的培养基出现凝结不上,变软的问题。一切程序在超净台上进行,等其彻底冷却凝结后,再封口。如果过于着急,也有可能出现凝结不好的问题。一旦出现就不能恢复。
3.还有一个可能就是培养基中加了什么物质影响琼脂的固化。
最后祝愿你实验一切顺利!
云在天边,水在瓶。
7楼2008-03-26 11:44:11
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