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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【有奖求助】琼脂不溶解是怎么回事
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【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 afeng541888 的 1 个金币

afeng541888

金虫 (正式写手)

木虫彪哥--钢钢的

[交流] 【有奖求助】琼脂不溶解是怎么回事

本人做植物组织培养，最近总是出现琼脂溶解不好的情况，以前是成块的，现在都是软软的，不知何故，应该不是琼脂的问题，换了好几个牌子了。
我用高压灭菌锅灭菌25分钟，121摄氏度。

请问：琼脂在这种情况下能溶解吗，应该没问题啊，以前可以的，最近还特意加大了ph值到6.0，请各位帮忙分析下原因。


在补充一下问题：我放8g琼脂，用灭菌锅121度，25分钟

[ Last edited by afeng541888 on 2008-3-27 at 11:30 ]
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1楼 2008-03-26 08:19:54
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人
★ ★
afeng541888(金币+2,VIP+0):谢谢
你测一下培养基的PH值，酸性时琼脂的凝胶就很软。另外温度最好不要高于125℃，控制好。
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细推物理须行乐。
2楼2008-03-26 08:27:25
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cauxiaogong

★ ★
afeng541888(金币+2,VIP+0):谢谢
琼脂在PH大于5都可以凝的，一般你加琼脂的量多少？ 质量好的琼脂粉13g就可以，差一些的就20g。要是你用的琼脂粉的化就更应该多些。
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3楼2008-03-26 08:52:38
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叶子1983

铜虫 (小有名气)
★ ★
afeng541888(金币+2,VIP+0):谢谢
温度应该很重要的，还有你使用什么溶液溶解的呢？
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4楼2008-03-26 09:36:13
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vicarner

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
afeng541888(金币+5,VIP+0):谢谢
一共有下列4中情况：
1.琼脂质量。
2.pH值。
3.灭菌温度。
4.培养基组成。
如果以上问题都可以排除，则是传说中的RP问题啦！呵呵~~
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5楼2008-03-26 09:52:44
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qinying

木虫 (著名写手)
个人认为可能的原因：
1.琼脂量加少了.质量好象不是主要问题。质量差的杂质多，倒是问题。温度过高,培养基中的糖炭化,会出现咖啡色培养基,但不影响固化.而pH值降低,会在一定程度上影响琼脂的软硬,但是好象效果并不明显.
2.温度的掌握似乎最有可能。灭菌锅电源切断后，压力表回零后，最好等一等，再取培养基。倒培养基时温度不宜过高。如果不是低熔点琼脂的话，60度左右比较合适。固定过程中不要摇动培养皿／瓶，如果晃动，有可能让刚刚开始固化的培养基出现凝结不上，变软的问题。一切程序在超净台上进行，等其%B
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云在天边，水在瓶。
6楼2008-03-26 11:40:58
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qinying

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
afeng541888(金币+8,VIP+0):谢谢
个人认为可能的原因：
1.琼脂量加少了.质量好象不是主要问题。质量差的杂质多，倒是问题。温度过高,培养基中的糖炭化,会出现咖啡色培养基,但不影响固化.而pH值降低,会在一定程度上影响琼脂的软硬,但是好象效果并不明显.
2.温度的掌握似乎最有可能。灭菌锅电源切断后，压力表回零后，最好等一等，再取培养基。倒培养基时温度不宜过高。如果不是低熔点琼脂的话，60度左右比较合适。固定过程中不要摇动培养皿／瓶，如果晃动，有可能让刚刚开始固化的培养基出现凝结不上，变软的问题。一切程序在超净台上进行，等其彻底冷却凝结后，再封口。如果过于着急，也有可能出现凝结不好的问题。一旦出现就不能恢复。
3.还有一个可能就是培养基中加了什么物质影响琼脂的固化。
最后祝愿你实验一切顺利！
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云在天边，水在瓶。
7楼2008-03-26 11:44:11
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