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Lopick专家顾问
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[交流]
怎么P一段基因的全长？
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各位大仙，以下是我的基因全长 1 atggcttctt tctttttctt tttttttgct gctatagatg agttgaagtt cacattttct 61 agggtgggag ctccaccaga agtagtagca aggctagtag ctgcccgtca ggagtttgaa 121 tccaaacaac gatcttcggt taattccaga gataatttga aagacccgga actagatcag 181 ttcatggagg cttattgtga catgctgatg aagtaccgag aggagctgac aagacccatt 241 caagaagcca tggattttat gcgaagaata gaaactcagc taaatatgat ctgcaacgga 301 cccttgcgga tcttcaactc tgatgagaaa tctgagggtg ttggatcgtc tgaggaggat 361 caagacaata gtggagggga aaccgaattg ccggagattg atcctcgggc tgaggaccga 421 gaactaaaga accatttatt aaggaaatat agtggctatc taagcagtct aaagcaggaa 481 ctttcaaaga agaagaagaa gggaaaacta cctaaagaag caaggcagaa gctacttagc 541 tggtgggagc tacactacaa atggccatat ccttcggaga ccgagaaggt ggcactggca 601 gaatcaactg gtttggacca gaaacaaata aataattggt tcataaatca gaggaaacga 661 cattggaaac cctcggaaga catgcaattc atggtgatgg atggtctaca tccacagaat 721 gcagctctgt atatggatgg tcactacatg ggtgatggtc catatcgtct aggaccatga 我设计的是前20，后20为上下引物，经检测引物设计不合理，特异性不强。希望各位指点，怎么设计引物才能P出该段基因的全长？必须用RACE吗？ |
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3楼2014-06-16 19:51:10
yuguiyan
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Lopick: 金币+1 2014-06-18 08:47:24
Lopick: 金币+1 2014-06-18 08:47:24
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亲，您所给的序列是780bp长的mRNA，准确表达应该是cDNA全长，而不是“一段基因的全长”。——您要构建Ubi超表达载体？ BTW，您知道引物设计的重要原则不？http://refer.biovip.com/doc-view-8401.html 参考贴：克隆基因全长引物设计问题http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1644284 |
4楼2014-06-18 01:40:15
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