应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 蛋白不挂柱
121/2返回列表12下一页
查看: 1443  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wqertyre

至尊木虫 (职业作家)

[求助] 蛋白不挂柱 已有6人参与

好不容易表达出来了，测序没问题，可溶性表达不挂Ni柱，包涵体用8M尿素变性过柱子也不挂，目的蛋白直接流出来了，到底是为什么呢？载体是pET22b
回复此楼

» 猜你喜欢
善由心生
1楼 2014-06-16 12:00:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Davie_Meagen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-16 12:40:44
wqertyre: 金币+2 2014-06-18 15:48:47
上样平衡溶液中不能有咪唑，PH最好在7.5左右，样品也是一样的条件。
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-16 12:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqertyre

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Davie_Meagen at 2014-06-16 12:27:05
上样平衡溶液中不能有咪唑，PH最好在7.5左右，样品也是一样的条件。

10mM的咪唑应该没有影响吧
赞一下 回复此楼
善由心生
3楼2014-06-16 12:54:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古月木木

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wqertyre: 金币+2 2014-06-18 15:48:39
平衡和加入目的蛋白后，放入4℃一定的时间，促进其特异性结合，
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-16 15:00:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Davie_Meagen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wqertyre at 2014-06-16 12:54:07
10mM的咪唑应该没有影响吧...

去掉试一试，一班不加咪唑。
赞一下 回复此楼
5楼2014-06-16 20:05:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqd767019087

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用his抗体试试 看看有没有表达his
赞一下 回复此楼
6楼2014-06-16 21:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu208xj

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wqertyre: 金币+2 2014-06-18 15:47:46
原因有以下几个点：1）树脂Ni流失；2）去掉10mM咪唑；3）调整pH在8.0以上；
赞一下 回复此楼
7楼2014-06-17 15:40:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqertyre

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
7楼: Originally posted by liu208xj at 2014-06-17 15:40:47
原因有以下几个点：1）树脂Ni流失；2）去掉10mM咪唑；3）调整pH在8.0以上；

为什么要PH8.0以上，有什么道理吗？
赞一下 回复此楼
善由心生
8楼2014-06-18 15:47:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqertyre

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 古月木木 at 2014-06-16 15:00:04
平衡和加入目的蛋白后，放入4℃一定的时间，促进其特异性结合，

怎么又碰到你了
回复此楼
善由心生
9楼2014-06-18 15:48:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古月木木

新虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by wqertyre at 2014-06-18 15:48:33
怎么又碰到你了...

啊，是吗？好吧，你好
赞一下 回复此楼
10楼2014-06-18 16:08:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wqertyre 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 情人节自我反思：在爱情中有过遗憾吗？ +5 瞬息宇宙 2026-02-15 6/300 2026-02-18 12:51 by 月下雪林
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:38 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:38 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:08 by lotyj5cz79
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 3/150 2026-02-18 06:53 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错，点赞！ +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题，请指教！ 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭