24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1524  |  回复: 11

wqertyre

至尊木虫 (职业作家)

[求助] 蛋白不挂柱 已有6人参与

好不容易表达出来了,测序没问题,可溶性表达不挂Ni柱,包涵体用8M尿素变性过柱子也不挂,目的蛋白直接流出来了,到底是为什么呢?载体是pET22b
回复此楼
善由心生
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Davie_Meagen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-06-16 12:40:44
wqertyre: 金币+2 2014-06-18 15:48:47
上样平衡溶液中不能有咪唑,PH最好在7.5左右,样品也是一样的条件。
2楼2014-06-16 12:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqertyre

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Davie_Meagen at 2014-06-16 12:27:05
上样平衡溶液中不能有咪唑,PH最好在7.5左右,样品也是一样的条件。

10mM的咪唑应该没有影响吧
善由心生
3楼2014-06-16 12:54:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古月木木

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wqertyre: 金币+2 2014-06-18 15:48:39
平衡和加入目的蛋白后,放入4℃一定的时间,促进其特异性结合,
4楼2014-06-16 15:00:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Davie_Meagen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wqertyre at 2014-06-16 12:54:07
10mM的咪唑应该没有影响吧...

去掉试一试,一班不加咪唑。
5楼2014-06-16 20:05:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqd767019087

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用his抗体试试 看看有没有表达his
6楼2014-06-16 21:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu208xj

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wqertyre: 金币+2 2014-06-18 15:47:46
原因有以下几个点:1)树脂Ni流失;2)去掉10mM咪唑;3)调整pH在8.0以上;
7楼2014-06-17 15:40:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqertyre

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by liu208xj at 2014-06-17 15:40:47
原因有以下几个点:1)树脂Ni流失;2)去掉10mM咪唑;3)调整pH在8.0以上;

为什么要PH8.0以上,有什么道理吗?
善由心生
8楼2014-06-18 15:47:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqertyre

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 古月木木 at 2014-06-16 15:00:04
平衡和加入目的蛋白后,放入4℃一定的时间,促进其特异性结合,

怎么又碰到你了
善由心生
9楼2014-06-18 15:48:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

古月木木

新虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by wqertyre at 2014-06-18 15:48:33
怎么又碰到你了...

啊,是吗?好吧,你好
10楼2014-06-18 16:08:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wqertyre 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085701环境工程求调剂 +11 多久上课 2026-03-27 12/600 2026-03-30 21:21 by 研究僧导导
[考研] 297 地理学070500 复试求调剂 +3 小圆圈圈ooo 2026-03-30 3/150 2026-03-30 21:05 by 余震yz
[考研] 08工科求调剂286 +4 tgs_001 2026-03-28 4/200 2026-03-30 21:03 by dophin1985
[考研] 277跪求调剂 +8 1915668 2026-03-27 12/600 2026-03-30 21:01 by dophin1985
[考研] 304材料求调剂 +5 钟llll 2026-03-26 5/250 2026-03-30 19:37 by 源_2020
[考研] 311求调剂 +7 蓝月亮亮 2026-03-30 7/350 2026-03-30 19:24 by 无际的草原
[考研] 抱歉 +3 田洪有 2026-03-30 3/150 2026-03-30 19:11 by 迷糊CCPs
[考研] 08工科,295,接受跨专业调剂 +3 lmnlzy 2026-03-30 3/150 2026-03-30 17:49 by wangjy2002
[考研] 284求调剂 +14 junqihahaha 2026-03-26 15/750 2026-03-30 14:12 by 探123
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学,化工,生物,生医工等专业优秀学子加入! +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +4 IceGuo 2026-03-26 5/250 2026-03-29 01:25 by griffith2014
[考研] 压国家一区线,求导师收留,有恩必谢! +7 迷人的哈哈 2026-03-28 7/350 2026-03-28 16:47 by 催化大白
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 347求调剂 +3 山顶见α 2026-03-25 3/150 2026-03-28 14:13 by 唐沐儿
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-27 7/350 2026-03-28 07:43 by 热情沙漠
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
信息提示
请填处理意见