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liuwo

金虫 (小有名气)

[交流] 请分离高手帮忙

我在分离一种物质，此物质甲醇溶解性不好，我用硅胶柱氯仿-甲醇梯度洗，但是几个梯度都有该物质，好几个梯度洗脱液点板发现存在多个斑点重复，物质分离度不好，有几个斑点一直存在好几个梯度，洗不完全啊，请高手指教一下我该怎么办啊，谢谢，万分感谢，

[ Last edited by xjxlovelxl on 2008-4-1 at 19:10 ]
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我思故我在
1楼 2008-03-25 00:15:41
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bigfishing

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
liuwo(金币+5,VIP+0):谢谢啊
哥们，有可能在硅胶上有吸附，不行换成其它柱子，你的产品显碱性吧，？要是带有胺基的话，不妨试试用1-3%的三乙胺二氯甲烷液预先装柱，(三氯甲烷毒性太大啦，哥们要注意了，保护肾脏要紧啊)，另外，甲醇比例不可太大，要不硅胶也冲下来了。最后，要是产品在柱上易变质的话，可以快速过柱，采用加压操作或是氮气流洗脱。。 祝好运。。。。
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GODHELPTHOSEWHOHELPTHEMSELVES！
2楼2008-03-25 04:38:21
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y-l-wang

木虫 (正式写手)
★ ★
liuwo(金币+2,VIP+0):谢谢
用氯仿－甲醇梯度洗脱时，不要把梯度设计的太密，梯度洗脱目的是将产品分段便于下一步的细分
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3楼2008-03-25 11:43:38
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golkey

铁虫 (正式写手)
★ ★
liuwo(金币+2,VIP+0):谢谢
用DMF容了，往里加甲醇试试，能析出来不
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4楼2008-03-25 12:05:07
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flyingskynk

荣誉版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主
该物质有可能与氯仿的溶解性好
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总有一些旋律，突如其来地迫入耳际，然后，无法忘记；总有一些字句，不由自主地哼在嘴边，从此，烙于心底
5楼2008-03-25 13:59:35
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leiopixie

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
liuwo(金币+5,VIP+0):谢谢提出纠正建议
楼主的问题描述的还不够具体啊
1、甲醇里溶解性不好，那你是用什么溶解的呢？上柱如果用的是湿法，那么溶剂是什么？
2、选用氯仿-甲醇的依据是什么？你用氯仿-甲醇系统点板能分离吗？是否拖尾？比例多少？
3、好几个梯度都有，那么你的梯度具体是怎样的呢？
以上问题可以判断出洗脱系统是否合适，上样方式，梯度设置等。楼主可以看看相关的书籍，祝楼主好运！
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每天一帖，你进步我进步！www.utoauto.com
6楼2008-03-25 17:42:55
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leiopixie

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
liuwo(金币+5,VIP+0):谢谢帮助！！尽量推荐几本书吧，自己找很盲目啊，呵呵
liuwo(金币+5,VIP+0):谢谢帮助！！尽量推荐几本书吧，自己找很盲目啊，呵呵
“甲醇溶解性不好，用水溶解拌料”
不知道你是用什么萃取得到的，但是能够说明你的样品极性很强，一般强极性部分可以用大孔树脂先分一下；
“选氯仿甲醇没什么依据”
选择溶剂洗脱系统一定要有依据，一般是用薄层层析先试分一下，选择能够分离你的目标物质的体系，然后按照薄层板上位移0.2的比例作为起始梯度，再缓慢加大极性。
“请指教顺便介绍几本书”
你可以看一些关于天然产物分离相关的书籍，有很多，具体的名字我记不得了，你可以再图书馆看看，还有就是关于薄层层析的书要重点看看，对于你找系统有帮助。
祝好运！
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7楼2008-03-28 17:06:51
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么辣子

银虫 (正式写手)
★
liuwo(金币+1,VIP+0):呵呵
参考相关文献 决定洗脱剂

楼上几位说的都对 应该有依据
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8楼2008-03-28 18:13:52
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zhouifang

金虫 (正式写手)
★ ★
liuwo(金币+2,VIP+0):xiexie
首先，同意2楼的说法。
做层析前要先做TLC选择溶剂系统的。有时做梯度会出现目标物在每个梯度都有的情况，但根据梯度的不同其分布的量和其他一些杂质的量也应该是不同的，点板观察应该是有比较明显的趋势的。
我们做梯度一般都是先用一个梯度把前段杂质尽量洗下来，然后再用一个合适的梯度把目标物洗下而又不至于把后段的杂质洗下。
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天行健
9楼2008-03-31 13:55:21
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shine815

金虫 (正式写手)
★
liuwo(金币+1,VIP+0):好，呵呵
用氯仿－甲醇梯度洗脱时，不要把梯度设计的太密，梯度洗脱目的是将产品分段便于下一步的细分
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我的道路我来走我的人生我做主
10楼2008-03-31 16:46:32
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