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liuwo

金虫 (小有名气)

[交流] 请分离高手帮忙

我在分离一种物质，此物质甲醇溶解性不好，我用硅胶柱氯仿-甲醇梯度洗，但是几个梯度都有该物质，好几个梯度洗脱液点板发现存在多个斑点重复，物质分离度不好，有几个斑点一直存在好几个梯度，洗不完全啊，请高手指教一下我该怎么办啊，谢谢，万分感谢，

[ Last edited by xjxlovelxl on 2008-4-1 at 19:10 ]
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我思故我在
1楼 2008-03-25 00:15:41
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zhouifang

金虫 (正式写手)
★ ★
liuwo(金币+2,VIP+0):xiexie
首先，同意2楼的说法。
做层析前要先做TLC选择溶剂系统的。有时做梯度会出现目标物在每个梯度都有的情况，但根据梯度的不同其分布的量和其他一些杂质的量也应该是不同的，点板观察应该是有比较明显的趋势的。
我们做梯度一般都是先用一个梯度把前段杂质尽量洗下来，然后再用一个合适的梯度把目标物洗下而又不至于把后段的杂质洗下。
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天行健
9楼2008-03-31 13:55:21
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bigfishing

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
liuwo(金币+5,VIP+0):谢谢啊
哥们，有可能在硅胶上有吸附，不行换成其它柱子，你的产品显碱性吧，？要是带有胺基的话，不妨试试用1-3%的三乙胺二氯甲烷液预先装柱，(三氯甲烷毒性太大啦，哥们要注意了，保护肾脏要紧啊)，另外，甲醇比例不可太大，要不硅胶也冲下来了。最后，要是产品在柱上易变质的话，可以快速过柱，采用加压操作或是氮气流洗脱。。 祝好运。。。。
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GODHELPTHOSEWHOHELPTHEMSELVES！
2楼2008-03-25 04:38:21
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y-l-wang

木虫 (正式写手)
★ ★
liuwo(金币+2,VIP+0):谢谢
用氯仿－甲醇梯度洗脱时，不要把梯度设计的太密，梯度洗脱目的是将产品分段便于下一步的细分
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3楼2008-03-25 11:43:38
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golkey

铁虫 (正式写手)
★ ★
liuwo(金币+2,VIP+0):谢谢
用DMF容了，往里加甲醇试试，能析出来不
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4楼2008-03-25 12:05:07
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