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MandaDu

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 642.5
帖子: 17
在线: 8.2小时
虫号: 3227121
注册: 2014-05-22
性别: MM
专业: 食品科学基础

[求助] 想做casein zymography 测calpain活性酪蛋白不溶，怎么配分离胶呢...

求助各位有经验的前辈：
想用酪蛋白活性电泳测钙蛋白酶活性，可是酪蛋白不溶...12.5%的分离胶不知道该怎么配，我该怎么配置酪蛋白溶液呢...分离胶成份包括丙烯酰胺、Tris-HCl（pH 8.8）、APS、TEMED......
我看有人说可以在配置酪蛋白溶液时加NaOH,煮沸什么的不会影响电泳效果吗？什么方法最好呢？
急求..谢谢大家了

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1楼 2014-06-15 10:37:51

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cuibaow110

木虫 (小有名气)

食品小博

应助: 0 (幼儿园)
金币: 4284.2
散金: 297
帖子: 232
在线: 84.8小时
虫号: 959866
注册: 2010-03-03
性别: GG
专业: 食品加工技术

当然不能NAOH煮沸咯，参考Raser, K. J., A. Posner, and K. K. W. Wang. 1995. Casein zymography:A method to study µ-calpain, m-calpain, and their inhibitoryagents. Arch. Biochem. Biophys. 319:211–216.里面有详细方法。我最近也要做这个，可否交流交流。

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你若安好，我便晴天

2楼2014-10-18 09:40:24