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MandaDu

铜虫 (初入文坛)

[求助] 想做casein zymography 测calpain活性 酪蛋白不溶,怎么配分离胶呢...

求助各位有经验的前辈:
    想用酪蛋白活性电泳测钙蛋白酶活性,可是酪蛋白不溶...12.5%的分离胶不知道该怎么配,我该怎么配置酪蛋白溶液呢...分离胶成份包括丙烯酰胺、Tris-HCl(pH 8.8)、APS、TEMED......
    我看有人说可以在配置酪蛋白溶液时加NaOH,煮沸什么的 不会影响电泳效果吗? 什么方法最好呢?
    急求..谢谢大家了
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cuibaow110

木虫 (小有名气)

食品小博

当然不能NAOH煮沸咯,参考Raser, K. J., A. Posner, and K. K. W. Wang. 1995. Casein zymography:A method to study µ-calpain, m-calpain, and their inhibitoryagents. Arch. Biochem. Biophys. 319:211–216.里面有详细方法。我最近也要做这个,可否交流交流。
你若安好,我便晴天
2楼2014-10-18 09:40:24
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