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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 想做casein zymography 测calpain活性 酪蛋白不溶，怎么配分离胶呢...
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MandaDu

铜虫 (初入文坛)

[求助] 想做casein zymography 测calpain活性 酪蛋白不溶，怎么配分离胶呢...

求助各位有经验的前辈：
    想用酪蛋白活性电泳测钙蛋白酶活性，可是酪蛋白不溶...12.5%的分离胶不知道该怎么配，我该怎么配置酪蛋白溶液呢...分离胶成份包括丙烯酰胺、Tris-HCl（pH 8.8）、APS、TEMED......
    我看有人说可以在配置酪蛋白溶液时加NaOH,煮沸什么的 不会影响电泳效果吗？ 什么方法最好呢？
    急求..谢谢大家了
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1楼 2014-06-15 10:37:51
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cuibaow110

木虫 (小有名气)

食品小博
当然不能NAOH煮沸咯，参考Raser, K. J., A. Posner, and K. K. W. Wang. 1995. Casein zymography:A method to study µ-calpain, m-calpain, and their inhibitoryagents. Arch. Biochem. Biophys. 319:211–216.里面有详细方法。我最近也要做这个，可否交流交流。
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你若安好，我便晴天
2楼2014-10-18 09:40:24
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