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davidck金虫 (正式写手)
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[交流]
急急急！连接问题！请虫友帮忙！
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我的目的基因将近3Kb，一直连不上T载体（TaKaRa PMD19-T），用的是Pfu扩的基因，PCR后直接在反应产物加了Taq用来加A，然后胶回收，转化，转化菌长出的有不少白斑，挑了十几个都是假阳性。所以怀疑是不是加A和纯化有问题。 我想请虫友们帮忙分析一下，我下面的实验方案是否可行。在PCR结束后，先切胶回收，再进行Taq加A反应，之后再用PCR产物回收试剂盒回收纯化一下，然后再做连接转化 |
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4楼2008-03-23 15:40:36
lauren180
木虫 (著名写手)
小木虫挖井人
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2319.2
- 帖子: 1735
- 在线: 67.5小时
- 虫号: 494550
- 注册: 2008-01-14
- 专业: 环境微生物学
2楼2008-03-23 13:32:56
3楼2008-03-23 13:37:23
5楼2008-03-23 20:13:49