应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » K562细胞转染，效率太低，如何解决？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 4229  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wkzhangchi

新虫 (初入文坛)

[求助] K562细胞转染，效率太低，如何解决？ 已有1人参与

构建了一个pEGFP-C2的重组质粒，转染两种不同的细胞，发现293T效果较好，但是K562效果很差。各位大侠们有没有做过K562转染的，怎样才能提高转染效率呢？
附件是我的实验记录，一言难尽，只能全部贴出来了。
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : K562细胞转染实验记录效果图.doc
    • 2014-06-09 15:49:45, 25 M

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-06-09 16:03:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liug268

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励热心回帖交流 2014-06-11 19:03:54
引用回帖:
3楼: Originally posted by wkzhangchi at 2014-06-10 14:51:09
非脂质体也没试过么？我第二次用的转染试剂是非脂质体试剂，说明书上也有转该细胞的，可惜我做出来的效率低。lonza试剂盒能更具体点么Nucleofector™ Kits for Cell Lines？这里面有好多产品呢...

附件中是那个试剂盒的说明书。
非脂质体转染试剂没试过，你也懂的，lipo2000不行之后直接骗老板钱用最好的啊
这个试剂盒比较贵，还有就是必须用特定的转染仪。不过我觉得用普通电转仪优化一下也应该可以的。
祝你实验顺利
赞一下 回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : K562转染.pdf
    • 2014-06-11 09:01:38, 205.2 K
5楼2014-06-11 09:02:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

liug268

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wkzhangchi: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-06-10 14:51:33
您好，我一直在做K562细胞的转染。
这种细胞想用脂质体转是基本不太可能了，推荐电转。电转的话推荐Lonza的试剂盒，效率大概在40%左右。
除了电转之外，提质粒的时候注意除内毒素，提取后用滤膜滤一下。
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-10 11:58:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wkzhangchi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liug268 at 2014-06-10 11:58:28
您好，我一直在做K562细胞的转染。
这种细胞想用脂质体转是基本不太可能了，推荐电转。电转的话推荐Lonza的试剂盒，效率大概在40%左右。
除了电转之外，提质粒的时候注意除内毒素，提取后用滤膜滤一下。

非脂质体也没试过么？我第二次用的转染试剂是非脂质体试剂，说明书上也有转该细胞的，可惜我做出来的效率低。lonza试剂盒能更具体点么Nucleofector™ Kits for Cell Lines？这里面有好多产品呢
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-10 14:51:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ysk1989

新虫 (小有名气)
推荐英格恩生物的转染试剂，纳米聚合物材料，效果远远高于脂质体转染。并且可以加一定量的抗生素和血清，如果细胞状态好，不需要换液。
赞一下 回复此楼
6楼2016-07-28 11:42:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 材料学硕333求调剂 +7 北道巷 2026-03-24 7/350 2026-03-27 00:30 by wxiongid
[考研] 349求调剂 +4 李木子啊哈哈 2026-03-25 4/200 2026-03-26 22:49 by fmesaito
[考研] 一志愿北化求调剂 +3 Jsman 2026-03-22 3/150 2026-03-26 21:06 by ajpv风雷
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-26 6/300 2026-03-26 18:03 by 邱gl
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂310 +3 温柔的晚安 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:16 by peike
[考研] 材料求调剂 +4 .m.. 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:30 by peike
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 6/300 2026-03-24 15:03 by 余意卿
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿华中科技大学071000，求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭