应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » K562细胞转染，效率太低，如何解决？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 4227  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wkzhangchi

新虫 (初入文坛)

[求助] K562细胞转染，效率太低，如何解决？ 已有1人参与

构建了一个pEGFP-C2的重组质粒，转染两种不同的细胞，发现293T效果较好，但是K562效果很差。各位大侠们有没有做过K562转染的，怎样才能提高转染效率呢？
附件是我的实验记录，一言难尽，只能全部贴出来了。
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : K562细胞转染实验记录效果图.doc
    • 2014-06-09 15:49:45, 25 M

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-06-09 16:03:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wkzhangchi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liug268 at 2014-06-10 11:58:28
您好，我一直在做K562细胞的转染。
这种细胞想用脂质体转是基本不太可能了，推荐电转。电转的话推荐Lonza的试剂盒，效率大概在40%左右。
除了电转之外，提质粒的时候注意除内毒素，提取后用滤膜滤一下。

非脂质体也没试过么？我第二次用的转染试剂是非脂质体试剂，说明书上也有转该细胞的，可惜我做出来的效率低。lonza试剂盒能更具体点么Nucleofector™ Kits for Cell Lines？这里面有好多产品呢
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-10 14:51:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

liug268

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wkzhangchi: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-06-10 14:51:33
您好，我一直在做K562细胞的转染。
这种细胞想用脂质体转是基本不太可能了，推荐电转。电转的话推荐Lonza的试剂盒，效率大概在40%左右。
除了电转之外，提质粒的时候注意除内毒素，提取后用滤膜滤一下。
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-10 11:58:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liug268

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励热心回帖交流 2014-06-11 19:03:54
引用回帖:
3楼: Originally posted by wkzhangchi at 2014-06-10 14:51:09
非脂质体也没试过么？我第二次用的转染试剂是非脂质体试剂，说明书上也有转该细胞的，可惜我做出来的效率低。lonza试剂盒能更具体点么Nucleofector™ Kits for Cell Lines？这里面有好多产品呢...

附件中是那个试剂盒的说明书。
非脂质体转染试剂没试过，你也懂的，lipo2000不行之后直接骗老板钱用最好的啊
这个试剂盒比较贵，还有就是必须用特定的转染仪。不过我觉得用普通电转仪优化一下也应该可以的。
祝你实验顺利
赞一下 回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : K562转染.pdf
    • 2014-06-11 09:01:38, 205.2 K
5楼2014-06-11 09:02:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ysk1989

新虫 (小有名气)
推荐英格恩生物的转染试剂，纳米聚合物材料，效果远远高于脂质体转染。并且可以加一定量的抗生素和血清，如果细胞状态好，不需要换液。
赞一下 回复此楼
6楼2016-07-28 11:42:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学308分求调剂 +5 你好明天你好 2026-03-23 5/250 2026-03-26 23:43 by 催化大白
[考研] 333求调剂 +6 wfh030413@ 2026-03-23 6/300 2026-03-26 22:45 by 学员8dgXkO
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 303求调剂 +7 元夕元 2026-03-20 8/400 2026-03-26 20:38 by 不吃魚的貓
[考研] 085701环境工程，267求调剂 +4 minht 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:14 by barlinike
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 材料277求调剂 +5 min3 2026-03-24 5/250 2026-03-26 15:13 by zzll406
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 材料与化工085600，总分304，本科有两篇sci参与，求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 一志愿深大，0703化学，总分302，求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭