24小时热门版块排行榜    

查看: 2872  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

karuirui

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR阴性对照出条带,但是内参没有,换了一管新的引物还是有条带 已有4人参与

请教各位大神,PCR阴性对照(没有cDNA,只有引物、水、taq酶)出条带,而且大小正好是我的目的基因大小,循环32圈,但是内参的阴性没有条带,这是为什么呢!以为是引物被污染了,但是换了一管新的,还是有目的条带!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karuirui

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-07-09 02:50:12
我不是大神,是一边想以便录入的,所以第一次回答只回答了可能的污染的一个原因。

个人意见,仅供参考。

看来御姐我正在写的“PCR实验的常见问题与讨论-------凌波丽 个人总结第七季”的内容也要膨胀很多 ...

谢谢!非常感谢!
17楼2014-07-11 13:26:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
karuirui(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-06-08 20:50:15
水或试剂被污染了
或者是你记错了

一般这种情况,阴性出来肯定不正常,除非你的片段刚好100bp左右,跟引物二聚体大小差不多,这种情况也存在。

建议把所有试剂换了重新做一边,如果还出来,极有可能是二聚体
天行健
2楼2014-06-08 17:26:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karuirui

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-06-08 17:26:04
水或试剂被污染了
或者是你记错了

一般这种情况,阴性出来肯定不正常,除非你的片段刚好100bp左右,跟引物二聚体大小差不多,这种情况也存在。

建议把所有试剂换了重新做一边,如果还出来,极有可能是二聚体

我所的东西都换了,包括水……还是有。目的条带的大小是二百多。
3楼2014-06-09 10:52:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

引用回帖:
3楼: Originally posted by karuirui at 2014-06-09 10:52:29
我所的东西都换了,包括水……还是有。目的条带的大小是二百多。...

神了个奇,难道你的引物被污染了?这个很少见啊,你试一下,换组其他引物来扩增你的cDNA,如果依然可以扩增出来200bp,额,见鬼了
天行健
4楼2014-06-09 11:41:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学调剂0703 +7 啊我我的 2026-03-11 7/350 2026-03-15 23:03 by 凌千颂111
[考研] 274求调剂 +4 时间点 2026-03-13 4/200 2026-03-15 15:29 by Rambo13
[考研] 289求调剂 +5 步川酷紫123 2026-03-11 5/250 2026-03-15 00:45 by kruisytel
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 材料工程,326分,求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 一志愿中科院,化学方向,295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 285求调剂 +4 ytter 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:48 by jxchenghu
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 08食品或轻工求调剂,本科发表3篇sci一区top论文,一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵, 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考研] 纺织、生物、化学、材料相关专业招生了 +4 耶耶业 2026-03-09 7/350 2026-03-12 19:05 by Equinoxhua
信息提示
请填处理意见