24小时热门版块排行榜    

查看: 518  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达 已有2人参与

在收集蛋白的过程中发现蛋白变红了,而且还有一股臭臭的味道,请问是为什么,这种情况是正常的么?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爨乡主人

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你用的什么宿主菌?我们曾经一次用毕赤酵母,用了假冒的氨水,结果诱导前期没事,到了60小时左右菌体裂解,发酵液变成红色,前期表达的蛋白也降解了。
4楼2014-06-10 20:51:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
收集过程中变红,还是洗脱的时候就是红的?

如果是逐步变红,可能是蛋白暴露在空气里后被氧化(cofactor, 金属离子),洗脱液里加入5-10 mM 的巯基乙醇应该有所帮助,

能提供更多信息的话,会有助于进一步判断
行至水穷处,坐看云起时
2楼2014-06-08 18:47:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-06-08 18:47:22
收集过程中变红,还是洗脱的时候就是红的?

如果是逐步变红,可能是蛋白暴露在空气里后被氧化(cofactor, 金属离子),洗脱液里加入5-10 mM 的巯基乙醇应该有所帮助,

能提供更多信息的话,会有助于进一步判断

不好意思 可能是我没有说清楚 这里的红色不是指纯化后的蛋白是指在收菌的过程中发现菌体呈红色 想知道是什么原因引起的菌体变红,发臭
3楼2014-06-09 23:33:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 爨乡主人 at 2014-06-10 20:51:26
你用的什么宿主菌?我们曾经一次用毕赤酵母,用了假冒的氨水,结果诱导前期没事,到了60小时左右菌体裂解,发酵液变成红色,前期表达的蛋白也降解了。

我是做原核表达,用的是Rosetta
5楼2014-06-10 23:49:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +40 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 42/2100 2026-08-14 00:15 by Nc5Ys9F5ntlw
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +11 医学老男孩 2026-08-13 29/1450 2026-08-14 00:04 by 大快人心啦
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +9 Tide man 2026-08-10 10/500 2026-08-13 20:33 by 温淼淼淼
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +4 majunge000 2026-08-11 6/300 2026-08-13 16:50 by 四季常青藤
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
信息提示
请填处理意见