24小时热门版块排行榜    

查看: 519  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达 已有2人参与

在收集蛋白的过程中发现蛋白变红了,而且还有一股臭臭的味道,请问是为什么,这种情况是正常的么?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-06-08 18:47:22
收集过程中变红,还是洗脱的时候就是红的?

如果是逐步变红,可能是蛋白暴露在空气里后被氧化(cofactor, 金属离子),洗脱液里加入5-10 mM 的巯基乙醇应该有所帮助,

能提供更多信息的话,会有助于进一步判断

不好意思 可能是我没有说清楚 这里的红色不是指纯化后的蛋白是指在收菌的过程中发现菌体呈红色 想知道是什么原因引起的菌体变红,发臭
3楼2014-06-09 23:33:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
收集过程中变红,还是洗脱的时候就是红的?

如果是逐步变红,可能是蛋白暴露在空气里后被氧化(cofactor, 金属离子),洗脱液里加入5-10 mM 的巯基乙醇应该有所帮助,

能提供更多信息的话,会有助于进一步判断
行至水穷处,坐看云起时
2楼2014-06-08 18:47:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爨乡主人

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你用的什么宿主菌?我们曾经一次用毕赤酵母,用了假冒的氨水,结果诱导前期没事,到了60小时左右菌体裂解,发酵液变成红色,前期表达的蛋白也降解了。
4楼2014-06-10 20:51:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 爨乡主人 at 2014-06-10 20:51:26
你用的什么宿主菌?我们曾经一次用毕赤酵母,用了假冒的氨水,结果诱导前期没事,到了60小时左右菌体裂解,发酵液变成红色,前期表达的蛋白也降解了。

我是做原核表达,用的是Rosetta
5楼2014-06-10 23:49:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +23 医学老男孩 2026-08-13 49/2450 2026-08-14 20:02 by zhaifei
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见